(OK) Ronéo 2 p 15 : immunofluorescence indirecte

[Azula]

Salut

Petite question p 15 de la ronéo , il est dit que pour visualiser des protéines intracellulaires avec la technique de l'immunofluorescence indirecte,
il fallait fixer la cellule et donc la tuer.
Pourtant il existe la microinjection, l'élèctroporation et la vectorisation par vésicules qui je crois n'entraine pas la mort ?

Raccourcie du prof ou explication farfelue

Merci

[Bittoucell]

En fait, ce qu'on te dit, c'est que les Ac primaires et secondaires sont trop gros pour rentrer dans la cellule et choper une protéine, donc on doit tuer les cellules et les ouvrir pour visualiser les protéines avec cette technique. l'immunofluorescence indirecte n'est pas faite pour la visualisation de protéines intracellulaires même si c'est "possible" de le faire.

Et bien sûr, les techniques que tu énumères : microinjection, vectorisation, électroporation : ça permet de faire rentrer de la fluorescence dans la cellule sans la tuer.

Il y a aussi la technique d'expression d'une protéine hybride X-GFP qui ne tue pas la cellule.

Tu vois ce que je veux dire ?

[Azula]

Je vois totalement même !

Merci

[Milou]

Bonjour ! Je up le sujet car j'ai une question sur l'IFI,
dans les annatut qcm 22 chap2 un item dit
"Pour utiliser l'IFI, il faut au préalable fixer la structure a étudier"

J'aurai mis faux car on ne fixe que si la protéine a étudier est intracellulaire, mais si elle est transmembranaire y'a pas de soucis
Je peux avoir confirmation ?
Merci d'avance et bonne journée !

[Mugiwara]

UP UP UP !

[-Alexis]

Effectivement, au vu de ce qui a été dit cette année c'est bien faux !