Diapo 2 (VB1)
Diapositive 6 : Remplacez "1 dNTP radiomarqué" par "1 ddNTP radiomarqué"
Diapo 3 (VB2)
Diapositive 18 : Le schéma n'est pas tout à fait correct. Les biotines doivent être enlevées pour que ça soit plus juste.
Ronéo 1
Page 2 : Corrigez la phrase "A la thérapeutique : Apparition de la thérapie génique qui consiste à faire pénétrer des gènes ou des protéines dans les cellules ou les tissus d'un individu pour traiter une maladie."
Ronéo 2
Page 8 : Remplacez "Notre vecteur pourra alors se refermer avant même de s'être inséré dans notre plasmide." par "Notre plasmide (= vecteur) pourra alors se refermer sur lui-même avant d'avoir intégré l'insert."
Page 9 : Rajoutez dans la phrase "Seules les bactéries ayant inséré l’ADN recombinant (vecteur + ADN) et celles ayant intégré un vecteur vide (sans insert) ont pu se développer puisqu’elles contenaient le gène de résistance à l’ampicilline."
Page 9 : Remplacez "On a également besoin d’IPTG et d’X-Gal qui sont des substrats de la ß-galactosidase." par "On a également besoin d'IPTG (inducteur du gène de la ß-galactosidase) et d'X-Gal (substrat de la ß-galactosidase)."
Ronéo 3
Page 4 : Le passage de la Ronéo sur les adaptateurs et les Barre Codes n'est pas très clair. Il faut bien différencier les deux, c'est pas la même chose!
Réponse de la Prof :Faut-il bien faire la différence entre adaptateurs et Barre Code ? Les adaptateurs A et P1 étant un couple d'amorces, et le Barre Code étant une séquence supplémentaire de nucléotides que l'on rajoute afin "marquer" le fragment d'un patient pour pouvoir le reconnaitre après (avec 1 BC différent pour chaque patient).
Votre explication est juste : Les Barre Codes permettent « d’identifier » un patient. Ce qu’il faut surtout comprendre c’est l’intérêt d’utiliser les adaptateurs A et P1 : cela permet avec un seul couple de primers (complémentaires des adaptateurs A et P1) d’amplifier toutes les régions d’ADN fragmentées quelque soit leur séquence.
La différence entre adapteurs et BC : les BC ont des séquences différentes entre les patients. Tous les adaptateurs A ont la même séquence pour tous les patients et tous les adaptateurs P1 ont la même séquence pour tous les patients. Par contre A et P1 sont de séquences différentes.
Page 6 : Remplacez dans la phrase "Le primer qu’on va appeler P1 et fixer sur la sphère va être complémentaire de la séquence 5’ -> séquence 3' de notre fragment d’ADN."
Page 6 : Remplacez "billes magnétiques biotinylées" par "billes magnétiques recouvertes de streptavidine"
