ME/MEB?

[Claracoïde]

Bonjour !!

D'après la roneo, il est possible de faire une reconstruction 3D avec la technique d'ombrage, mais du coup on peut quand même faire une étude en ME classique ? Pcq pour moi il n'y a qu'avec la MEB qu'on peut faire une reconstruction 3D..

Et juste une mini précision : au final il n'y a que la cryomicroscopie qui ne nécessite pas de tuer la cellule ?

Merci d'avance ❤️

[melatonine]

Salut !

En fait il faut comprendre à quel moment tu vas utiliser la technique d'ombrage plutôt que la ME à transmission classique ++ (ronéo 4 page 14)

L'ombrage sert à renforcer le contraste d'un échantillon de très petite taille et très faiblement contrasté. tu vois par exemple qu'avec cette technique on peut observer des filaments d'ADN déroulés, et il est bien sûr impossible avec cette résolution d'avoir le relief de la molécule d'ADN.. On ne peut pas reconstruire l'ADN en 3D

L'ombrage peut également servir à reconstruire des images en 3D (par exemple les molécules de myosine, on voit bien qu'elles sont en reliefs)

La technique d'ombrage est donc une technique spéciale de ME à transmission qui peut nous permettre de visualiser et d'étudier des petits éléments (grâce au contraste) mais aussi de reconstruire des molécules en 3D par exemple !

Il n'y a pas qu'avec la MEB que l'on peut faire de la 3D ++

Pour ta 2ème question : viewtopic.php?f=973&t=85903&p=462362&hilit=cryomicroscopie#p462362
Dis moi si c'est plus clair !

Après, tout ça, c'est de la biocell ... Donc retenez la version du Pr. Gilson (en plus c'est le chef de l'UE2, donc si Long-Mira vous met un truc faux, ce sera sûrement annulé...)

Bon courage !

[Claracoïde]

Merci beaucoup pour ta super explication !!!

Pour la 2eme question, heureusement que tu m'as redirigée vers ce post pcq j'avais pas capté la nuance !
Cependant ma question etait plutôt de savoir si la cryomicroscopie etait la seule technique qui pouvait éviter de dénaturer la cellule ?
Et donc du coup, si meme dans ce cas on peut pas parler de cellule vivante, il n'y a aucune technique énoncée dans son cours qui fait référence à une cellule vivante n'est-ce pas ?

[melatonine]

Voilà c'est ça pour la cryomicroscopie ! En fait ça fait référence à la partie sur le conditionnement (page 4 et 5), on peut utiliser soit le formol soit la congélation.

L'inconvénient du formol, même si c'est le plus utilisé, c'est qu'il dénature les tissus.. C'est HP, retiens uniquement ce qu'il y a écrit dans le cours (Tu dois retenir que le conditionnement permet de préserver la morphologie cellulaire et tissulaire +++) Je t'explique ça juste pour que tu comprennes la nuance pour la cryomicroscopie

La cryo-microscopie, comme son nom l'indique utilise la congélation, donc l'autre moyen de conservation ++ l'architecture tissulaire est encore mieux préservée. Ya aussi l'examen extemporané qui utilise la congélation ! (page 4)

Dans ce cours on est en présence de cellules mortes. Notre but c'est d'observer des coupes de tissus au microscope, donc forcément il va falloir couper (du coup rigidifier, colorer etc etc en amont !) et les cellules n'aiment pas trop ça

J'espère que tu comprends mieux tout ça !

[Claracoïde]

Tout compris !!! Merci beaucoup !