Hey !
Alors je t'avoue que je ne comprends pas trop ce qui te pose problème
Déjà tu dois comprendre qu'on va amplifier par PCR les allèles du gène WFS1 du patient, pas de de ses parents !
Dans le cadre du cours tu peux penser qu'on amplifie séparément le matériel génétique du père puis le matériel génétique de la mère, mais c'est uniquement pour que vous compreniez la logique de l'arbre généalogique et les modalités de transmission de la maladie (étant donné qu'elle est récessive c'est un peu plus compliqué)
On va donc faire une PCR avec le matériel génétique de notre patient, où effectivement l'ADN du père et de la mère se retrouve ensemble étant donné qu'on est en présence d'un allèle paternel et d'un allèle maternel
Quand tu fais ta PCR au fond peu importe de savoir pour le diagnostic de quel parent provient quel chromosome, tu peux toutefois le déterminer en faisant à part une PCR avec les deux allèles paternels et une autre avec les deux allèles maternels et on compare les résultats (ce qui a été fait dans la démarche du cours encore une fois pour votre compréhension mais ce n'est pas systématique en clinique)
Tu dois vraiment comprendre que tant qu'on a pas fait de clonage moléculaire les deux allèles du patient sont indissociables +++
Pourquoi ?
Tout simplement parce que quand on amplifie spécifiquement un gène on va le cibler avec des amorces précises caractéristiques d'un petit bout de sa séquence et uniquement de la sienne histoire de ne pas aller amplifier inutilement le gène d'à côté.
Sauf que quand on procède ainsi, on va certes arriver à isoler un gène, mais pas un allèle de ce gène car même s'il y a du polymorphisme entre allèles, la portion de séquence reconnue est tellement générale et semblable d'un allèle à l'autre qu'on va sélectionner les deux allèles du patient indifféremment !
L'appariement n'a pas besoin d'être parfait pour fonctionner même si quelques nucléotides de la séquence changent, la différence sera non significative et on va ainsi amplifier à la fois l'allèle paternel et l'allèle maternel du patient !
On peut même aller plus loin en affirmant que même lors du clonage, on peut séparer nos allèles en en mettant un seul par vecteur et un seul vecteur par bactérie, mais on est parfaitement incapable de savoir où est l'allèle paternel et où est l'allèle maternel, ce n'est que le séquençage final des produits PCR séparés qui nous permettra de les distinguer !
Voilà pourquoi on n'a pas d'autre choix que de tout amplifier et séquencer en bloc, c'est bon ?
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shame on me, du coup désolée de t'avoir fait travailler!