Sélection des clones bactériens

[Tristampax]

Bonjour !
Dans la ronéo 2, on dit que la sélection Blanc/Bleu sélectionne les bactéries ayant intégré un vecteur avec insert uniquement, mais je me demandais : Comment est-ce qu'on a fait pour les séparer des bactéries qui n'avait pas intégré de vecteurs ? (Puisque celles-ci apparaitront blanche aussi)

J'avais compris que la sélection Blanc/Bleu était plus efficace que la sélection à l'ampicilline.. Est ce qu'il faut donc coupler ces deux types de sélection pour ne garder que les bactéries qui ont intégré un vecteur avec insert uniquement, ou est-ce que juste une sélection Blanc/Bleu suffit ?

J'espère que vous aurez compris mon soucis, merci d'avance !

[louuu]

Hello!

Lorsque tu te retrouves avec tes clones bactériens, tu as 3 possibilités :
1° des bactéries sans ADN recombinant (et dans ce cas elles seront sensibles à l'ampicilline);
2° des bactéries avec ADN recombinant avec l'ADNc du père;
3° des bactéries avec ADN recombinant avec l'ADNc de la mère.

Le cas n1 ne nous intéresse pas du tout, on veut donc se débarrasser de ces bactéries. Pour ça, on va faire une sélection à l'ampicilline (les bactéries sans ADN recombinant y sont sensibles et seront donc éliminées, mais les bactéries avec un ADN recombinant vont "survivre" indépendamment de la présence de l'insert ou pas).

Maintenant pour savoir le quel de ces ADN est recombinant avec l'ADNc de la mère, on va faire la sélection blanc-bleu.

Ce sont 2 étapes successive qui permettent au final de récupérer les bactéries ayant un insert.

J'espère que c'est plus clair et que c'est bon pour toi

[Tristampax]

Oui beaucoup plus clair merci beaucoup !