Immunoblot de l'ADN

[widedost]

Encore moi

Je comprends pas comment fonctionne l'immunoblot de l'ADN

[yaya06]

Bonjour,

Alors les prémisses de cette expérience, les choses à savoir sont que :
C'est une technique par électrophorèse sur gel d’agarose
On va se baser ici sur le fait qu’en apoptose on va avoir une fragmentation de l’ADN
et de la chromatine en général.
La caspase 3 est mise en jeu dans l’apoptose.

Donc dans l'expérience:
On a différents puits avec différents extraits d'ADN de différentes cellules.
Suivant les puits,on induit ou non cette caspase 3 et on observe au cours du temps la fragmentation de l’ADN pour différencier les cellules normales des cellules apoptotiques en mesurant le poids moléculaire de différents échantillons dans les différents puits.

Les résultats sont que :
Dans le puit 1, on a pas d'induction de la caspase-3 (le - au dessus traduit cela), et au bout de 120 min, l’ADN n’est pas
fragmenté, on en conclut que les cellules ne sont pas apoptotiques , sinon on aurait la fragmentation de l'ADN. C'est un peu le puit témoin sans la caspase-3
Dans les puits 2 à 6, malgré l’induction de la caspase 3(+ au dessus), on a pas de fragmentation de l’ADN car
le poids moléculaire ne change pas, les cellules ne sont pas apoptotiques non plus.
Dans les puits 7 à 11, après induction de la caspase 3 on observe la fragmentation au cours du temps de l’ADN car le poids moléculaire diminue, en effet le morceau d'adn se fragmentent en morceaux plus légés, les cellules sont apoptotiques.

Voilà, j'espère que c'est plus clair pour toi, bon courage pour la suite

[widedost]

Meeeerciiii