Vecteurs d’expression

[fionaaa]

Salut
Je comprends pas vraiment la partie sur les vecteurs d’expression
A part la fixation du tag et ce que ça implique (codon start/ stop) le reste c’est assez flou pour moi
Du coup si pourriez mexpliquer (même sans rentrer trop dans les détails mais pour que je comprenne l’intention et l’intérêt et que comme ça en reprenant je puisse comprendre mieux) : quand est-ce qu’on fait ce genre de clonage (enfin est-ce que c’est juste pour étudier la localisation des protéines ou pas?) et pourquoi il faut Pour les gènes et origines de réplication qu’il y ait un procaryote et un eucaryote de chaque, à quoi sert l’etape avec le phosphate de calcium
(Bon en fait tout sauf les tags)
Désolée pour ce post long
Merci beaucoup ?

[Hugodzilla]

Salut,

Alors le clonage d'expression cherche à forcer la cellule eucaryote à exprimer une protéine après amplification bactérienne ! +++

En gros on le fait pour vraiment pour étudier artificiellement dans les cellules l’expression de cette protéine ! Ce n'est pas QUE pour étudier la localisation des protéines ! Même si elle le permet

Du coup on va faire comme dans le clonage moléculaire introduire un vecteur contenant des régions spécifiques PROCARYOTES pour AMPLIFIER le gêne que l'on veut étudier dans une cellule PROCARYOTES --> TRANSFORMATION

Mais dans ce même vecteur on va mettre des régions spécifiques EUCARYOTES car on faire exprimer ce vecteur dans des cellules EUCARYOTES --> TRANSFECTION

Le phosphate de calcium est juste un outil parmi d'autre pour faire une transfection, c'est à dire un outil pour introduire un vecteur dans une cellule eucaryote !

D'autre question ma chère ?

[fionaaa]

Non c’est deja beaucoup plus clair merci beaucoup beaucoup
J’essayerai de revoir avec le cours et si j’ai d’autres questions je me manifesterai

[Hugodzilla]

De rien