ombrage/cryofracture

[lea63103]

salut

j'ai du mal a comprendre les différences entre la coloration par ombrage et la cryfracture/cryomicroscopie autant dans les techniques de manipulations que dans le résultat obtenu et les objectifs ...

merci

[Kanye Western-Blot]

Heyy !

Je vais te faire un mini récap un peu détaillé sur les 2 techniques mais sache que le Pr.Gilson n'est pas très pointilleux sur les détails de ces techniques, on est pas en histologie après tout ahah !

Alors la coloration par ombrage permet d'observer le relief d'une molécule/bactérie/virus. Pour se faire cette technique nécessite la vaporisation de métaux lourds sur l'échantillon, de côté avec un angle un peu spécial, de sorte à obtenir un contraste créant ainsi un relief, avec des "ombres" .

--> Pour cette technique retient essentiellement qu'on effectue une vaporisation de métaux lourds sur l'échantillon, et qu'on va effectuer une observation indirecte de l'échantillon ++ (puisqu'on observe le relief de l'échantillon ainsi que ses ombres et pas l'échantillon directement)


Pour la cryomicroscopie c'est un peu différent car il y a quelques étapes en amont ! On effectue une cryofracture de l'échantillon, c'est à dire qu'on va refroidir l'échantillon et qu'on va le fracturer avec des outils, cela permet d'enlever le dessus de l'échantillon. On passe par une étape de sublimation pour augmenter le relief. ENSUITE on vaporise également la surface de l'échantillon avec des métaux lourds (comme dans la coloration avec ombrage !!) puis on observe le relief de l'échantillon fracturé.

--> Pour cette technique retient essentiellement qu'on va fracturer le dessus de la cellule à froid, qu'on effectue une vaporisation de métaux lourds sur l'échantillon, qu'on effectue encore une fois une observation indirecte de l'échantilllon, et le + important, que cette technique permet d'ÉVITER LA FIXATION CHIMIQUE et ainsi LIMITER LES RISQUES DE DÉNATURATION DE LA CELLULE ++++ .

Ne te prends pas trop la tête pour tous les petits détails ... Je te conseille de retenir ce qui est surligné, c'est déjà AMPLEMENT suffisant pour la Biocell'

J'espère que c'est bon pour toi ! Bonne journéee

[lea63103]

c'est parfait merci !