Immunofluorescence indirecte double

[linaryu]

Salut salut
à propos de l'immunofluorescence indirecte, il y a un truc un peu flou pour moi
je sais qu'un anticorps secondaire doit être d'une espèce différente de son anticorps primaire, mais est-ce qu'il doit aussi être différent de l'autre anticorps primaire? Par exemple un ac secondaire de phoque avec un ac primaire de vache, et pour l'autre protéine un anticorps secondaire de chien avec un ac primaire de phoque, est-ce que ça marche ? Je sais pas si c'est évident ou pas mais ça me perturbe

[Kanye Western-Blot]

Hello ! Oui il faut qu'ils soient différents

--> Prenons le cas où on étudie une protéine X et une protéine Y.

L'anticorps secondaire de la protéine X doit être différent de l'anticorps primaire fixé sur la protéine X MAIS IL DOIT ÊTRE AUSSI DIFFÉRENT de l'anticorps primaire fixé sur la protéine Y


Donc un anticorps secondaire de phoque avec un anticorps primaire de vache c'est OK (parce que les deux espèces sont différentes)
Et ensuite anticorps secondaire de phoque avec un anticorps primaire de phoque sur l'autre protéine C'EST PAS BON (parce qu'on a 2 fois phoques !)

J'avais du mal l'année dernière avec ça au début mais une fois que ce que je t'ai expliqué c'est rentré ça va tout seul !