Double immunofluorescence indirecte

[Tom_vdlg]

Salut,

Je me pose une question, lors de la double immunofluorescence indirecte il faut utiliser deux fluorochromes différents. Mais ma question se pose entre deux fluorochromes. La fluorescine (FITC) et la GFP sont toutes deux excitées dans le bleu et émettent dans le vert mais du coup cela ne poserait-t-il pas de problème dans un QCM ? Parce que techniquement ce sera bien deux fluorochromes différent mais comme ils émettent et s'excitent dans les mêmes longueurs d'ondes ça serait compliquer de différencier non ? Le prof poserait-il ce genre de question ?

Merci d'avance.

[Kanye Western-Blot]

Hello Siphano

En effet, quand on dit qu'il faut que les 2 fluorochromes soient différents cela implique que leur spectre d'émission soit différent, c'est à dire qu'ils doivent émettre 2 longueurs d'ondes différentes ++++

La FITC et la GFP sont effectivement différent dans le sens où se sont 2 molécules différentes (une est une très grosse protéine, l'autre une petite molécule) mais elles émettent la même longueur d'onde, donc colorer au GFP + FITC ne sert absolument à rien tu as bien compris !

C'est bon pour toi ?

[Tom_vdlg]

Je vois que la biocell a du coup un matière de YouTubeur. Ouais c'est parfaitement clair, merci