séparation ADNc

[lea63103]

hello

A propos du syndrome de Wolfram, on dit que le clonage moléculaire va nous permettre de séparer l'ADNc père et mère, mais je n'arrive pas a voir quelle étape nous permet cette séparation.

merci

[AnNévrisme]

Salut

En réalité ce qui te permet de séparer ADNc paternel et maternelle c'est :

Qu'un vecteur puisse accueillir un seul insert
-> donc 1 ADN recombinant = 1 ADNc père ou mère

Et qu'une bactérie puisse accueillir un seul ADN recombinant.
Ensuite la bactérie se multipliera sur le gel avec antibio (les ADN dedans aussi) et on obtiendra une colonie à partir de cette bactérie. On sait que la colonie sera pure contenant plein de copie dans les bactéries d'ADN paternel ou maternelle.

Donc à ce moment là tu sais que :
Une colonie = un ADN paternel OU maternel
-> Tu sais pas encore quelle colonie contient quel ADN mais tu sais quelle en contient un seul type
PS: pour l'instant on s'en fiche c'était pas le but tu sauras plus tard au séquençage (étape juste après la carte de restriction : non vu a la tut rentrée mais dans la fiche)

Dans le labo tu sais que si avec des pipettes tu attrapes une bactérie de chaque colonie différente et que tu les met chacune dans des tubes à essai différents tu arrives à isoler dans chaque tube une bactérie avec un seul ADN donc dans chaque tube a essai tu as un seul type d'ADN : maternel ou paternel

amplifier ET Isoler c'était bien notre but en faisant le clonage moléculaire

C'est un peu mieux ?

[lea63103]

C’est nickel merci beaucoup !