tut 11 QCM 4

[Anamniocentèse]

Salut!

J'ai du mal à comprendre, la PCR en temps réel est surtout quantitative ça signifie qu'on l'utilise pour trouver combien il y a de mutations sur un gène ou plusieurs gènes? Et pas si on veut connaitre 1 mutation c'est ça?

[AnNévrisme]

Salut,

Alors non, si on fait une PCR suivie d'un séquençage le but est d'obtenir la suite exacte de nucléotides ---> but qualitatif

Tandis que dans la PCR en temps réel (seule) le but n'est pas d'obtenir la séquence du gène.
PCR en temps réel : on va faire une PCR "normale" mais y ajouter des agents fluorescent (que ce soit la sonde Tasman ou la technique SYBRGreen). Au fur et à mesure des cycles ils vont dégager de la fluorescence au cours de l'etape d'élongation. On mesure à la fin de chaque cycle la fluorescence.
Le moment où la fluorescence commencera à vraiment augmenter (début de la phase exponentielle) s'appelle le cycle seuil Ct. Ce qu'il faut avoir en tête c'est que plus tu avais de matériel génétique de base chez ton patient moins se sera long d'arriver a ce cycle.
Donc en connaissant ce cycle (5e/ 10e cycle etc...) On peut savoir la quantité d'ADN de base qu'on avait chez le patient !

---> c'est donc une technique quantitative on obtient une quantité d'ADN du patient

C'est la technique utilise actuellement pour le Covid-19 on peut savoir la quantité de virus présent chez le patient.

C'est plus clair ?

[Anamniocentèse]

Haa d’accord! Merci beaucoup c’est plus clair