ccb 5 qcm 8

[lympho6mon B]

Salut,
Je ne comprends pas pourquoi lors de la PCR sans l'exon 3, elle ne peut pas marcher sur le reste (exon 2 pour la PCR1 par exemple), comme elle a marché pour la PCR 2 ?
Surtout qu'on a juste à connaitre 18-20 nucléotides avant et après le segment, donc du moment qu'on a ces nucléotides, on peut faire la PCR non ?

[AnNévrisme]

Salut

Rappel d'énoncé : on SUSPECTE une mutation dans l'intron 2 on veut ici le prouver et comprendre l'impact sur l'epissage.

Pour cela on va réaliser différentes PCR des ARNm à différents endroits pour voir si l'endroit où on fait la PCR (et donc les amorces utilisées par la même occasion) nous apprennent quelque chose.

Alors c'est pas forcément facile mais il faut bien partir dans l'idée que les généticiens au labo sont face à un tube PCR (il ne voient pas le gène comme sur le schéma) et se qu'ils interpréteront c'est seulement le gène ---> il ne peuvent pas voir à travers le gène est savoir si la mutation est vraiment sur l'intron 2 et savoir quel impact elle aura sur l'epissage au niveau de l'ARNm.

Ici : on remarque que les PCR 1 et PCR 3 ne fonctionne pas chez la malade !
Or la PCR 2 fonctionne
Le point commun entre PCR 1 et 3 c'est qu'elles utilisent toutes les deux une amorce sur les deux appartenant à l'exon 3
Or la PCR 2 n'en utilise pas et elle, elle fonctionne

on en déduit que la mutation a eu pour effet de faire sauter à l'epissage l'exon 3.

C'est ok?

[lympho6mon B]

Oui mais j'ai compris qu'on a plus l'exon 3 mais pourquoi le fait qu'on l'a plus nous empêche de faire les PCR ? Parce que nos amorces sont en amont et en aval de 18-20 nucléotides.

[AnNévrisme]

Ta délétion englobe avec elle les 18 à 20 nucléotides d'amont et d'aval étant donné que ce sont les sites d'excisions oû se placent le spliceosome pour couper au moment des étapes d'epissage de l'ARNm.

Donc considéré que l'exon saute avec ses 18 et 20 nucléotides d'amont et d'aval