FISH

[Tweety]

Bonjour, est ce que quelqu'un voudrait bien m'expliquer à quoi correspond le FISH, je comprend pas vraiment les explications de la fiche...

[HyDr0]

Il me semble que c'est pour marquer un brin d'ADN ou un brin d'ARN. Pour l'ADN il faut d'abord dénaturer l'hélice pour n'en récupérer que la moitié, tu reconstruis par la suite le brin d'ADN avec une sonde complémentaire a sa sequence qui aura été préalablement marqué par des fluorochromes.

[Dorian427]

oui voilà Hydro a parfaitement resumé
Le FISH (=fluorescence in situ hybridation) sert à visualiser un gène en particulier dans l'ADN de la cellule.
Pour cela il faut dénaturer l'ADN. Autrement dit il faut le chauffer (50 degrés) pour pouvoir séparer tes 2 brins enroulés en hélice. Tu fabriques ensuite en laboratoire une séquence complémentaire du gène à étudier sur laquelle tu mets des fluorochromes. C'est ce qu'on appelle une sonde fluo.
Et là ......... (roulements de tambour) ........ ta sonde s'associe spontanément au gène qui devient visible.

P.S: ça marche aussi avec l'ARN (même principe)

[Dorian427]

Au fait quand on dit qu'on fabrique une séquence complémentaire, j'éspère que vous comprenez qu'il s'agit d'un brin artificiel qui contient les bases azotées complémentaires du gène.

Autre question que je m'étais posé en P1 (dsl si je vous devance ^^) :
Pourquoi on utilise pas des intercalants (fluorescence induite) au lieu du FISH?
C'est vrai que la fluorescence induite est beaucoup plus simple à mettre en oeuvre pour visualiser l'ADN.
Mais on ne peut pas visualiser un gène en particulier.
Voilà c'est tt bête