Tutorat 4 (30/11) QCM 25

[*Tayma*]

Salut ^^
J'aimerais savoir pourquoi l'item 5) : Il y a FRET si l'on remplace la streptavidine par de la BSA marquée à l'AF 555, a été compté faux Est-ce que l'on sait qu'il n'y a pas de FRET parce qu'on a la même quantité de fluorescence rouge en présence et en absence de AF647 biotine ? Merci d'avance

[Chas]

Je profite de ce post pour râler (encore ): item 2, Quand il y a FRET, le prof nous a dit qu'aucune énergie rayonnée n'était "permise" de la part de la molécule 1 excitée (ok c'est pas formulé comme ça du tout, mais en gros l'ensemble des photons émis par A sont reçus par B). Donc TOUTE l'énergie émise par AF 555 est absorbée par AF647. J'ai compté l'item faux parce que pour moi c'est un transfert de la totalité de l'énergie rayonnée.
Alors comme on a pas les connaissances de fouu pour connaitre le mécanisme exact, ça me semblait un peu ambigüe. Du coup j'avais réponse E. Help

[Dadaski]

Tayma c'est exactement ça si tu as la même quantité de fluorescence rouge cela veut dire qu'aucune énergie fluorescente a été transféré sous forme de FRET.

Chas tu as raison, mais dans ce QCM on parle de beaucoup d'AF555 et AF647, il n'y aura pas FRET avec tout les fluorochromes c'est pour ça que ta fluorescence diminue.

[Chas]

Ah parce que AF555 englobait l'ensemble des fluorochromes ???. Si c'est le cas, je suis désolée, mais je trouve pas ça très clair. Pour moi AF 555 c'est une molécule avec un fluorochrome.

[Dadaski]

AF 555 c'est un fluorochrome, je suis désolé si tu n'as pas compris qu'on parlait de l'ensemble des molécules AF555 mais c'est important, quand on te parle d'intensité de fluorescence ce sera toujours pour un ensemble de fluorochromes, ça n'aurait pas de sens pour un seul fluorochrome pour les raison que tu as donné toi même un fluorochrome ça émet toujours avec la même intensité...

[Endless]

Bonsoir!

J'en profite pour demander quelques précisions

J'ai compris, si y'a de la fluorescence rouge y' pas de fret

Maintenant pour l'item 5 je vois pas comment prouver que c'est faux avec les données du qcm
Je suppose qu'il faut se servir des petites colonnes où on voit écrit BSA et des + et -
Problème: ça m'indique l'intensité de fluorescence mais pas la couleur

Bref, je vais pas plus m'enfoncer, j'attends votre raisonnement

Merci!

[Dadaski]

l'histogramme reporte l'intensité de la fluorescence rouge c'est marqué dans le texte et au dessus de l'histogramme...
La fluorescence rouge ne varie pas quand on remplace la streptavidine par du BSA ce qui indique qu'il n'y a pas FRET...