wow wow wow,
Reprenons tout doux:
Tout d'abord
Hybridé = 2 simples brins qui ont des séquences complémentaires : ils se collent.
Associé = aucune définition précise en génétique, utilisé au même titre que hybridé
Ensuite,
p4: on parle des bords que peuvent laisser les enzymes après digestion : 2 possibilités selon que l'enzyme coupe les deux brins face à face ou décalé:
1._______ _______________
_______________ _______
OU 2._______ _______
_______ _______
dans le
cas 1 : les brins sortants vont pouvoir se réhybrider avec une séquence complémentaire (quelle qu'elle soit) parce que elle a des nucléotides tous seuls qui ne demandent à trouver un copain.
dans le
cas 2. : aucune hybridation possible avec quoi que ce soit puisque chaque nucléotide a son copain.
p9: on parle des possibilités d'interraction entre vecteur et insert, après digestion par des enzymes identiques et différentes: je reprends l'ordre de la ronéo:
(
vert=insert ;
rouge=vecteur)
1.vecteur et insert ont tous les deux des brins sortants des deux cotés, et ayant été digéré par les mêmes enzymes, on a une complémentarité parfaite entre vecteur et insert (attention, pas obligé d'être digéré par les mêmes enzymes pour les deux extrémités: c'est pour ca que les brins sortants sont différents sur mon schéma)
...________ _______________________________________ ___________ ... ..._______________ ________________________ _____________________ ...2.d'un coté vecteur et insert sont bords francs et de l'autre, V et I ont des brins sortants: comme tout à l'heure les brins sortants s'hybrident, ce qui met face à face les brins francs de l'autre extrémité: ils peuvent être reliés par une ligase.
..._______ ____________________ _____________......_______________ ____________ _____________...3. Les deux brins sont bords francs des deux cotés: là aucune hybridation possible puisque pas de simple brin. par contre grace à la ligase on va pouvoir les coller. un problème se pose: il n'y a aucune spécificité, et le vecteur a plus de chance à se recoller directement apres digestion que d'attendre gentiment qu'un insert vienne s'intercaller. On faut donc l'astuce décrite dans la ronéo.
..._______ ____________ _____________......_______ ____________ _____________...POUR CONCLURE:
p9 on ne disait pas du tout :
violette a écrit:- des extrémités cohésifs des deux cotés
il n'y a pas d'hybridation spontanée
- des bords francs des 2 cotés
il y a hybridation spontanée
Il manque juste un truc dans la ronéo pour éviter la confusion
ronéo p9 a écrit: ->les enzymes laissent des bords francs des deux cotés : problème ! car la ligase a plus de probabilité de refermer le vecteur sans insert…
J'espère que ca va, demandez si ca va pas
L.
