Criblage d'hybridome

[Mika]

Bonjour, M Gilson a vraiment ete vite sur cette experience ce matin, et donc j'ai une ptite question :
D'un coté on a les c de myelomes HGPRT - qui ne peuvent donc pas se diviser ...
Mais de l'autre on a les lymphocytes de la rate (qui eux ne sont pas HGPRT- et sont capables de pousser en milieu HAT non ?). Alors pourquoi tous ces lymphocytes disparaissent lors du transfert en milieu HAT ?

Et en fait la finalité de cette experience je ne la voit pas trop :/
Est ce que qlqn pourrait m'eclairer svp ?

[Ondine]

Alors, d'après ce que j'ai compris, et je le fais de mémoire parce que j'ai assisté à votre cours ce matin mais j'ai pas encore fait la ronéo :
Les cellules de myélomes sont HGPRT négatif et en plus, au départ, ils sont en milieu HAT. Donc les 2 voies de formation des nucléotides sont inhibées, donc pas de division.
De l'autre côté nos LB sont normaux, c'est juste qu'ils ont une durée de vie extrêmement courte

On fait la fusion et on place dans un milieu HAT, on a donc 3 solutions :
- les cellules du myélomes seules ne peuvent toujours pas se diviser (HGPRT négatif + milieu HAT)
- les cellules des LB spléniques ont une durée de vie très courte (en quelques divisions elles crèvent) donc elles survivent pas non plus
- Seules les cellules fusionnées survivent car elles acquièrent l'immortalité de la cellule du myélome, et récupèrent la capacité de division par la présence de HGPRT sauvage des LB spléniques (il y a complémentation)

Je vais faire la ronéo et je viens te confirmer ça

@+

[Mika]

Ok super j'avais pas noté la durée de vie. Merci bcp

Mais sinn le simple ajout de télomérase aux lymphocytes sécrétant l'anticorps anti gene X n'aurait pas suffit ?

[Ondine]

Salut !
Franchement, je sais pas te répondre, j'aurais tendance à penser que oui, ça pourrait marcher, mais à mon avis il y a un détail qui nous échappe.
Je pense que la mort des lymphocytes n'est pas la conséquence de la rétrécissement des télomères, je vais me renseigner et aussi faire la ronéo, et pourquoi pas demander à Gilson et je te dis ça le plus vite possible !

@+

[Mika]

Okey merci !

[Mika]

hello, j'ai tjrs pas eu de réponse, et ça m'interresse de savoir pk

[-Alexis]

Salut Mika,

alors en lisant le topic je pense pouvoir apporter une réponse mais pas sûr. En effet on n'avait pas eu cette partie du cours l'an dernier et je ne l'ai vue que très peu cette année.

Cependant, l'apoptose n'est pas uniquement due au rétrécissement des télomères ! Plein de facteurs rentrent en jeu (ex : la qualité de l'ADN après plusieurs réplications. La réplication peut provoquer des mutations, elles sont détectées durant la mitose et dans certains cas entrainent l'apoptose).

Il y a certainement d'autres processus déclenchant l'apoptose. C'est pour ça que rajouter seulement de la télomérase ne suffirait probablement pas.

Voilà, je sais pas si j'ai répondu (au moins en partie) à ta question. Je revois ça avec mes co-tuts, je te renvoie Ondine

[Mika]

ah ouai c'est une bonne explication ça !!
Merci beaucoup déjà pr ces réponses