Les applications de la fluorescence : L'intramoléculaire.

[Yehoo]

Bon voilà...
J'avais pas vraiment suivi cette partie en cours de ce matin... J'ai juste pris les photos et marqué quelques mots sans vraiment comprendre leur "sens" ni de quoi ils parlent.
J'ai aussi regardé la fiche de la Tut'Rentrée, j'ai lu, relu, et ré-relu et j'ai pas aussi vraiment compris le truc...

Donc si quelqu'un pour une petite explication toute simple. Ce serait génial !

Merci
et vive la Biocell

[GuillaumeVaast]

Salut Yehoo,

Alors je suppose que tu parles du FRET intramoléculaire:
Cette technique permet d'étudier la conformation d'une seul molécule. Dans le cours ET dans la fiche de tut' rentrée, on a pris l'exemple de calmoduline présente dans de nombreuse cellule et ayant la capacité de se replier lorsqu'elle est en présence de calcium. (on pourrai le faire avec une autre molécule du moment qu'elle change de conformation en fonction d'un paramètre cellulaire)

Donc on fixe deux fluorochromes dont les spectres d'émission et d'absorption se chevauchent (les coquins ) a chaque extrémité de la molécule, par exemple GFP et rhodamine.
En l'absence de calcium, la molécule reste a plat, du coup, les deux fluorochromes sont éloigné a plus de 10 nm ==> le fret est impossible, il n'y aura pas transfert d'énergie entre les 2 fluorochromes==> on ne verra que le spectre d'émission de la GFP.
En présence de calcium, la molécule se replie==> les deux extrémité se retrouve a moins de 10nm==> le FRET est donc possible==> en envoyant du bleu sur notre échantillon, la GFP l'absorbe et renvoi du vert immédiatement réabsorbé par la rhodamine==> on ne voit que du rouge.

Voila voila, j'espere t'avoir aidé.
Bon courage à tous.

[Yehoo]

Merci Guillaume ! C'est beaucoup plus claire maintenant !