Complémentation sur fibroblastes

[claire.d]

coucou

il fallait bien qu'une question sur la complémentation du cours de ce matin arrive alors voilà: je pense avoir compris la technique mais je voudrais savoir pourquoi dans l'exemple avec les fibroblastes le prof conclut directement que pour l'hétérocaryon XP1/XP2 il n'y a pas complémentation. Est-ce qu'il ne faut pas aussi fusionner les noyaux pour obtenir une cellule hybride et en fonction du résultat déterminer si oui ou non il y a bien complémentation ? (car l'ARN étudié peut très bien se trouver dans le noyau non ?)

je ne sais pas si j'ai été très claire dans ma question, sans l'image des diapos c'est un peu plus compliqué ...

merci d'avance

[Ondine]

Coucou !
Tu sais quoi, ta question avait été posée quasiment à l'identique l'an dernier par .... ALEXIS ton tut de biocell adoré.
ET ! David (notre tut de BioCell adoré à nous) avait même répondu :
Va voir c'est pas ici : viewtopic.php?lastaction=logout&f=183&t=13077

C'est juste ça, on sait que c'est cytoplasmique alors on s'embête pas avec le noyau hybride !
Mais t'as tout compris

@+

[-Alexis]

Héhé ! Je trouve que ta question est très pertinente ma chère Claire !
Sur le lien que t'a filé Ondine, c'est les 3ème et 4ème post qui sont intéressants pour toi.

A bientôt

[claire.d]

ouf ça me rassure, je pensais que j'avais peut-être mal compris l'expérience !
Merci à vous deux en tout cas pour cette réponse ultra rapide

à + !!

[ElDupon]

Bonsoir Bonsoir

J'ai une petite question :

Pour effectuer un test de complémentation, il faut impérativement que les allèles mutés soient récessifs.

Cependant, si l'on effectue le test en engendrant la fusion des noyaux de de cellules qui présentent la mutation, on sait déjà qu'il s'agit de deux cellules présentant la mutation sur un même gène, sachant que la mutation est récessive.

D'où : quel est l'interêt d'effectuer un test de complémentation par fusion de deux noyaux de cellules mutés, sachant que l'on sait déjà si elles présentent la mutations qu'elle portent les allèles mutés sur un même gène Sinon, si celles-ci seraient sur des gènes différents, ils ne seront pas de phénotype muté...

[Ondine]

Coucou !
Là ou tu fais ton erreur c'est sur la façon de faire le test de récessivité.

Soit :
- Une cellule A au phénotype muté, elle est rouge
- Une cellule B au phénotype muté, elle est rouge aussi
- Une cellule C sauvage, elle est rose fuchsia (Oui oui oui ...)

Quand tu fais un test de récessivité, tu ne fusionnnes pas les 2 cellules mutées entre elles comme tu fais pour le test de complémentation !
Tu vas faire une fusion A/C et une autre fusion B/C.
Si dans les 2 cas tu trouves une cellule rose fuchsia, alors c'est que tes mutations A et B sont récessives, mais tu ne sais en aucun cas si elles sont sur le même gène ! Pour cela il te faudra le test de complémentation.

Exemple de la suite des évênements :
- L'hétérocaryon A/B donne une cellule rouge => on est sur que les mutations A et B sont allèles (on peut imaginer que c'est 2 mutations différentes pour une même enzyme)
- L'hétérocaryon A/B donne une cellule rose fuchsia => on SUGGERE fortement que les mutations A et B sont deux mutations de 2 gènes distincts (par exemple 2 enzymes qui interviennent dans la synthèse du colorant rose fuschia de ta cellule ^^) on suggère parce qu'il y a possibilité de suppression intragénique ...

Voilà voilà !

[ElDupon]

Ah mais Ondine Justement, je ne parlais pas du test de récessivité

Je voulais parler du test de complémentation, où l'on combine deux allèles mutés différents en un individu diploïde pour connaître si ceux-ci sont des allèles d'un même gène ou d'un gène différent

[ElDupon]

D'abord, un test de complémentation peut-il être réalisé en opérant la fusion de deux cellules mutés ??

[Ondine]

D'abord, un test de complémentation peut-il être réalisé en opérant la fusion de deux cellules mutés ??

Euh ... C'est le but du test ! Là j'avoue que j'ai du mal à te suivre ...
Dans mon post précédent, à partir de "Exemple de la suite des évênements" c'est le test de complémentation qu'on est en train de faire ! C'est à dire la fusion des 2 cellules mutées !
Va voir ça, c'est un post que j'ai fait en début d'année : viewtopic.php?f=226&t=15555
Si c'est toujours pas clair dis nous !

A plus ! Bon courage, la complémentation c'est pas facile

[GuillaumeVaast]

Salut ElDupon,

Bon j'ai relu les 2 posts que tu as fait et une seul chose m'ai venu à l'esprit: une réplique de Némo: Ce P1 nous dit des mots, oui oui, je crois qu'il essaye de nous dire quelque chose, tu peux répéter petit?

Plus sérieusement, je ne comprend pas ou est le problème, dans le primer post, j'ai l'impression que ça vient du test de récessivité et après dans ton deuxième post, tu dis qu'en fait ça vient de la complémentation.

Poses les choses clairement à savoir: d'ou vient le problème, pourquoi un détail sur la méthode te fais penser qu'on fait des choses en trop/inutile ou incohérente. Et on pourra te répondre au mieux =D

[ElDupon]

Guillaume : c'est bon, c'est bon, je n'ai plus de questions,inutile de se pencher davantage sur mes balbutiements !

Je me prenais juste un peu trop la tête concernant le test de complémentation, alors que ce qu'il y a à comprendre et à retenir (quand est-ce qu'il y a complémentation, et qu'en est-ce qu'il y'en a pas, etc..) est évident.

[ElDupon]

Et Ondine : Merci pour ton lien, ton explication est très bien menée et très informative !

[GuillaumeVaast]

Ok ok, bonne continuation et bon courage.