QCM 2 - Extraction ADN

[flo77]

Bonjour,

J'ai eu du mal à la relecture de mes notes à bien comprendre l'extraction d'ADN à partir d'un prélèvement sanguin, du coup, j'avais répondu juste à l'item B, car je pense m'être emmêlé les pinceaux dans les explications données en cours. Serait-il possible d'avoir une explication rapide; moi j'ai noté:
- lyse des globules rouges avec solution hypotonique
- récupération du culot de leucocytes lavé et re-suspendu dans un mélange de détergent et de protéinase K => et c'est là que je me souviens d'une explication sur les lymphocytes, mais plus moyen de savoir quoi!!
- extraction avec phenol-chloroforme pour éliminer les protéines (là je ne sais pas de quelles protéines on parle!!)
- méduse d'ADN, etc.
Merci de toute explication

[BlackJesus]

Salut;

C'est bien ça

Alors l'extraction au phénol-chlorophorme et la protéinase K permettent d'éliminer les protéines autours de l'ADN (souvenir de Biocell) comme les nucléosomes pour n'avoir a la fin que le brin d'ADN décondensé sous forme de méduse

Ensuite l'item B est faux car l'extraction de l'ADN n'est possible que dans les globules blancs présentant un noyau et donc de l'information génétique ce qui n'est pas le cas du globule rouge ayant perdu ces organites et son noyau (souvenir d'histologie) du coup c'est pour cela qu'on utilise une solution hypotonique pour faire éclater les globules rouges pour les éliminer

En espérant que cela réponde a ta question !

[gabriel]

c'est bien ça...b c'est faux car pas de noyau dans les GR!!!!et pour la d les etapes sont inversées...

[flo77]

OK, merci. J'avais pas compris que la lyse des globules rouges c'était juste pour les faire éclater sans rien en retirer! J'avais oublié qu'ils n'avaient pas d'ADN!

[flo77]

Désolée encore mais du coup, dans l'item d du QCM1 du CCB du 21 avril, pourquoi l'item est faux, car on fait bien une lyse des globules rouges. La subtilité tient-elle au mot "Toujours" ?

Merci de tout éclairage,

[gabriel]

oui et aussi car ce n'est pas la 1ere etape