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Ligases après déphosphorylation


Ligases après déphosphorylation

Messagepar Pounia » 27 Avr 2012, 11:34

Bonjour,

Petite confusion suite à une info page 18 de la ronéo. Je resitue le truc : on a enlevé les phosphates des extrémités 5' du vecteur, et la petite ligase arrive toute combattante.
La phrase qui me pose problème est la suivante : "la ligase va pouvoir former des liaisons entre le 5' de l'insert et le 3' du vecteur mais pas entre le 3' de l'insert et le 5' du vecteur (OH-OH) " => la fin de la phrase ainsi que l'illustration juste en dessous sur la même page me gênent. En effet, si le 3 de l'insert et le 5 du vecteur ne peuvent se lier, comment on "colle" les bouts de ce côté ? Ca nous donne du coup une ouverture ... :/

merci à qui pourra m'éclairer
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Re: Ligases après déphosphorylation

Messagepar gabriel » 27 Avr 2012, 13:52

regarde ce lien tu comprendras mieux: faut garder en tete qu'il y a 2 brins d'ADN sur chaque extremités du vecteur et de l'insert
http://monde.ccdmd.qc.ca/ressource/?id= ... mande=desc
bizzz
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Re: Ligases après déphosphorylation

Messagepar Pounia » 27 Avr 2012, 14:21

Ah oui d'accord... Je savais qu'il y avaient deux brins mais en fait je pensais qu'il fallait que ça se "colle" (= Phosphate + OH) des DEUX côtés de l'insert pour chaque brin soit des 4 côtés en tout :)

Mais j'ai compris, merci !
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Re: Ligases après déphosphorylation

Messagepar gabriel » 27 Avr 2012, 17:09

De rien :wink: :D
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