DM UE11 correction détaillée qcm 1

[Céliine]

Bonjour , tout d'abord merci pour ce DM.
Alors , mon raisonnement pour le qcm 1 est le suivant :
pouvez-vous me dire si c'est le bon? :
J'ai directement regardé les profils de restrictions du qcm 2 : PVU II est en 4 exemplaires ,
HIND III est en deux exemplaires avec 6,5-3 = 3,5 . donc c et d sont faux
La somme de Pvu II fait 7kb donc B faux.
Par contre je n'ai pas regardé le schéma du qcm 1 pour le faire.
Donc ma question serait : comment résoudre le QCM 1 avec le premier schéma ?
J’espère m'être exprimée clairement.
Bonne journée !

[gabriel]

c'est correct comme raisonnement mais si tu n'avais que les donnees du qcm 1:
tu prends le pX, on coupe le fragment de 1kb de pX et on ajoute le fragment de 2 kb d'ADN contenant le site EcoRI, Pvu II et Bam HI du coup on obtient un pY de 7 kb (6-1+2) avec les memes sites de restriction que pX sauf Pvu II qui sera a 1kb et Bam HI qui se deplace a 2kb.
voila

[gabriel]

le but justement ici c de vous faire voir les 2 manieres de trouver la reponse

[Céliine]

Okay parfait : juste je ne comprends pas pourquoi on soustrait 1 au lieu de l'ajouter ?
est-ce parce que PVUII ne fait pas partie du fragment ECORI-Bam HI de 2 kb ?
encore merci !

[gabriel]

mais non pas du tout: quand on met les enzyme eco et bam on va couper un fragment de 1kb sur pX et une fragment de 2kb d'ADN qu'on va mettre sur pX a la place du fragment de 1kb coupé pour former pY

[margaux83]

coucou,
voilà j'ai vraiment beaucoup de mal avec ce type d'exercice, serait il possible de me réexpliquer sans trop en demander merci à celui qui aura la motive

[gabriel]

on veut faire un clonage donc on veut inserer un fragment d'ADN dans un vecteur pX.
on utilise les memes enzymes de restriction pour les 2: bam hI et ecoRI
comme tu peux le voir sur le morceau d'ADN qui sera l'insert a inserer ds le vecteur si on coupe avec ces 2 enzymes on aura un fragment ecorI-BamHI de 2kb et sur le vecteur ca va coupe un fragment de 1kb qui sera donc enlever pour etre remplacé par l'insert de 2 kb: du coup vu que la taille initiale du vecteur etait de 6kb, moins le morceau de 1kb coupé par les enzymes de restriction on aura un vecteur de 5kb ouvert dans lequel va s'inserer l'insert de 2 kb generer aussi par les enz de restriction; du coup pY aui est px+insert sera de 6-1+2=7kb.

[margaux83]

parfait ta reponse c'est magique tout devient plus clair du coup mais serait il trop te demander que de m'expliquer du coup comment on choisit entre la a et la c?

[gabriel]

ben regarde le fragment d'ADN, l'insert quoi, il y a 3 sites de restriction dessus:ecorI, pvuII et bamhI, qu'on doit retrouver forcement sur pY; sur la c il manque pvuII

[margaux83]

exact!!! et bien merci en tout cas pour ta précieuse aide

[gabriel]

De rien!!c avec plaisir!!content de tavoir aidé a y voir plus clair!bizz

[Mariiiine]

gabriel tu peux reexpliquer la première méthode de Céline un peu plus clairement stp??

merci & dsl !!

[gabriel]

elle a tout simplement utilisé les infos du qcm2 pour répondre au qcm 1:
le profil de restriction de pvu montre qu'il y a 4 sites de restriction et si on additionne les fragments d'ADN obtenus le total est de 7kb donc la seul réponse possible pour le qcm 1 est la a (4sites pvu et 7kb pour la taille du plasmide pY)

[Mariiiine]

tu gères!

[gabriel]