protéines RE

[Daphalgan]

Salut !

Je ne comprends pas pourquoi à la page 5, on dit : " détergent + protéase il ne se passe rien".
Est-ce que ça serait possible de réexpliquer brièvement cette expérience et ce qu'on peut observer en l'absence/présence de protéase/de détergent ?
De ce que j'ai compris, le détergent permet de faire sortir toute la protéine incorporée dans le RE et la protéase elle dégrade la protéine. Donc, quand on utilise détergent + protéase, on devrait détruire toute la protéine ?
Lorsqu'on utilise que la protéase, on va détruire que la partie de la protéine accessible et cela correspond à la séquence stop-transfert ?

Merci

[Yamitose]

Holà Daphnée !

On va reprendre l’expérience pour éclaircir tout ça

On va s’intéresser à la situation où la synthèse de la protéines s’est faite en présence du RE ! La situation sans RE est juste une expérience contrôle pour montrer que les modifications sont bien dues aux substances qu’on ajoute/retire et non à un autre phénomène.

Comment lire le schéma ?

Il représente une éléctrophorèse SDS-Page donc les traces que l’on voit sont des protéines situées plus ou moins loin du puit en fonction de leur poids moléculaire !

Quels sont les effets attendus des différentes substances utilisées ?

Le détergent : sert à libérer le contenu du RE cad la protéine !
La protéase : sert à dégrader la protéine non insérée dans le RE la partie de la protéine située APRÈS la séquence stop-transfert
Détergent + Protéase : sert à libérer puis à dégrader l’ensemble de la protéine

Donc on s’attend à ne voir aucune trace, donc aucune protéine dans le puit « détergent + protéase » car la protéine va être extirpée du RE pour être ensuite détruite ! C’est donc bien ce que t’as compris, et c’est l’absence de trace sur l’élétrophorèse qui le confirme !
(Lorsque fait tapé la ronéo, c’est vrai que j’ai utilisé les mots du prof, mais il ne se passe pas « rien » mais « on a rien » dans le puit plutôt)

Attention ! La partie dégradée en présence de protéase seule correspond à la séquence APRÈS la séquence stop-transfert ! Parce que c’est uniquement au moment où le RE reconnaît la séquence et arrête l’insertion de la protéine !

J’espère que c’était clair, si t’as d’autres questions ou si tu veux que je ré-explique n’hésite pas

[Daphalgan]

Merci beaucoup pour l'explication !
C'est très clair !