PCR-RLFP et séquencage

[Yasni]

Holaaaaaaaaaa

A propos de ce qcm, issus des annatuts de génétique de 2020-2021 :

QCM 1 : A propos de l’achondroplasie

A) On peut poser le diagnostic grâce à l’échographie.
B) C’est une maladie autosomique dominante dont 90% des enfants atteints ont leurs parents atteints.
C) Les formes homozygotes sont généralement plus graves.
D) Effectuer un PCR-RFLP est nécessaire et suffisant pour poser le diagnostic.
E) A, B, C et D sont fausses.

J'ai un problème avec la D : la correction est : D) Faux : ++ le PCR-RFLP est nécessaire mais pas suffisant ! On doit réaliser un séquençage

Mais pour moi, la PCR-RLFP ne nécessite pas un séquençage d'après ce schéma récapitulatif (contrairement à la PCR classique) :

Du coup faut retenir quoi ?

Merci au tuteur/ à la tutrice qui me répondra gros bisouuuuus

[Stabilo'drey]

Coucou !

Alors oui le moyen de diagnostic utilisé pour l'achondroplasie est la PCR RFLP. Ça veut dire que si on suspecte une achondroplasie, on réalise une PCR RFLP en premier lieu. Si le résultat ne montre pas de mutation, on s'arrête là, l'enfant n'est pas malade. Par contre si la PCR RFLP révèle bien la mutation, à ce moment là on doit réaliser une seconde technique afin de confirmer le diagnostique. Ça se fait soit par séquençage Sanger, soit par NGS.
C'est important de retenir que la PCR RFLP n'est pas un moyen suffisant pour poser le diagnostic définitif. C'est écrit à la fin du cours sur les moyen de biologies moléculaires.

C'est bon pour toi ?

[Yasni]

D'accord, je comprend mieux.

Mais du coup ca veut dire que pour une PCR normale, on fait forcément un séquençage ?

[Yasni]

Accessoirement, entre temps j'ai retrouvé la partie du cours qui parle de la pcr-rlfp, et on dit bien que l'on PEUT pas que l'on doit confirmé par pcr+séquencage, et on ne parle même pas de séquençage seul.

[Auréligament]

+1 pour moi aussi on était pas obligé de réaliser un séquençage...

[Stabilo'drey]

Globalement si, c'est important de le faire, et particulièrement dans le cas de l'achondroplasie où l'on réalise un diagnostique pré-natal. L'item est vraiment tourné de façon a vous faire comprendre qu'on veut une méthode de confirmation, soit NGS soit PCR + Séquençage Sanger.

Je vous met l'extrait de la ronéo sur les principes de biologie moléculaire (dernière page)