Clonage moléculaire

[Nelcds]

Bonjour, j'ai une question par rapport au clonage moléculaire.
Je crois que j'ai compris comment ça fonctionne avec l'insert et le vecteuret la sélection mais je ne comprends pas pourquoi le clonage moléculaire est indispensable pour déterminer le variant ?

[Stabilo'drey]

Holaaa !

Alors le principe c’est de séparer nos 2 allèles pour obtenir 2 séquençage distincts. Tu sais on a 2 allèles provenant chacun de nos parents. Et ils peuvent avoir des séquences différentes. Lorsque l’on fait une PCR classique, on fait une amplification des 2 allèles. Et quand on va faire le séquençage on peut se retrouver avec 2 séquences différentes mélangée ensemble.

Alors dans certains cas ça nous pose pas problème, comme dans l’achondroplasie où il y a juste une substitution à 1 seul endroit.
Mais si on prends notre exemple du cas relou du syndrome de Wolfram, on voit que c’est plus complexe. Ici on a 2 séquences qui se chevauchent l’une sur l’autre, et donc on arrive pas à savoir quel nucléotide appartient à quel brin. C’est pour ça qu’on dit que la séquences est illisible. Donc c’est là que l’on réalise notre clonage pour bien séparer les 2 produits et faire 2 séquençage indépendants pour lire correctement les 2 séquences différentes des 2 allèles.

Est ce que tu comprends mieux mtn ?

[Nelcds]

Ah d'accord en fait j'avais pas compris que les 2 séquencses se chevauchaient
C'est parfait merci beaucoup !