Je galère sur une partie de la ronéo de l'année dernière, la voici :
la ronéo de l'an passé a écrit:Lorsqu'un ARN est particulièrement grand et qu'on n'en connait pas la séquence, on peut utiliser des mélanges de petits primers de séquence aléatoire qui vont s'hybrider un peu partout et jouer le rôle d'amorces.
Ensuite, on fait une épreuve de de dégradation de l'ARN, ce qui est facile puisqu'il est relativement instable : on rajoute une RNAse H.
L'enzyme reconnait le double brin ADN-ARN et dégrade la partie ARN en laissant la partie ADN intacte.
On obtient un ADN simple brin que l'on peut amplifier... blablabla ^^
1- Il me semblait que la RNAse H détruit les amorces, non ? Par rapport au cours que l'on a eu avec Naïmi (2ème cours je crois) avec les fragment d'okasaki, c'était une RNAase (H1 ? ) qui dégradé les amorces non ?
2- Du coup, l'ADN ne reste pas intact ?
3- Il ne manque pas une étape avec une DNA ligase pour réunir chaque petit morceau et obtenir l'ADN simple brin entier ?
Merci d'avance !
on garde l'ADN car celui-ci n'est pas sensible à la RNase H.