CC 2010 QCM 6

[chelsea]

Slt, j'ai essayé de refaire le sujet et du coup je me suis aperçue que je n'ai pas compris grand chose au sujet des étiquettes et des protéines de fusion.

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La réponse proposée est D
1. L'ADN complémentaire ne doit pas posséder son ATG du départ pour pouvoir commencer à l'ATG du tag
2.VRAI
3. Je comprend pas pourquoi c faux
4. Apparemment c'est vrai ???
Je pensais que vu qu'on insère le tag en Nterm il fallait commencer en 5'?
5. Oui c'est bien ca on commence à l'ATG du tag et on fini au stop de l'ADN complémentaire

[Kardajian]

Salut !

Si on met l'étiquette en Nt , ça veut dire que l'ADN complémentaire sera en aval non ? Du coup il se fixera sur la partie 3' de l'étiquette :

~~~~~~~~~~~~~~Étiquette~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ADN
Nt 5'------------------------------------------3' 5'---------------------------------------3' Ct

Agree ?

[chelsea]

A tu veux dire que si on met l'étiquette en N term donc en 5' d'ADN complémentaire qui est le brin antisens sera en lui en 3' ?

[Kardajian]

A tu veux dire que si on met l'étiquette en N term donc en 5' d'ADN complémentaire qui est le brin antisens sera en lui en 3' ?

j'ai pas compris ce que tu voulais dire la dsl xD

[Chob]

J'ai rajouté les 3' et les 5', ça va peut être vous aider.

Protéine taguée en Nt :
il faut enlever / il vaut mieux enlever le codon ATG de l'ADNc , mais par contre il doit garder son codon stop.
Si on veut avoir la traduction de la protéine de fusion = TAG + protéine (et non pas de la protéine seule), il faut que la traduction parte du codon ATG qui va donner la méthionine du TAG.
on part du ATG du TAG et on finit par le codon-stop de l'ADNc

Protéine taguée en Ct:
il faut enlever le codon stop de l'ADNc, sinon la traduction s'aretera à celui-ci et on aurait jamais la traduction de la partie qu va donner le TAG : on aura juste une protéine, et pas une protéine de fusion.
Par contre, on garde le codon ATG de l'ADNc car la traduction va commencer à ce niveau là.
on part du ATG de l'ADNc et on finit par le codon-stop du TAG

Essayez de comprendre les items par vous même avec le schéma, puis si vous comprenez toujours pas redemandez moi !

[Kardajian]

C'est parfait Merci Chob !

[chelsea]

Oui merci bcp chob pour l'explication avec la photo (je suis sûre que je n'aurais as compris sinon )