(OK) Sélection négative

[Gonzaless']

Bonsoir !

En fait je bloque sur la sélection négative ( dans la purification sur support ) , je ne comprends pas bien son principe
Si quelqu'un avait la bonté de m'expliquer ca serait super

[P.U.C]

Salut, en fait c'est tout simple au lieu de sélectionner ceux qui vont se fixer (sélection positive), tu vas sélectionner ceux qui ne se fixeront pas (sélection négative) et c'est encore mieux puisqu'ils ne vont pas être modifié par l'interaction ligand/récepteur

Capito ? Ou je te la refais en mieux vu que je l'ai fais rapido là

[Mika]

Je vais te faire une petite explication détaillée ya rien de mieux, tu vas vite comprendre :

Tu as dans une solution 2 types cellulaires : des cellules avec l'antigène carré et des cellules avec un antigène rond.
Tu dispose d'anticorps anti-antigène rond. Tu obtiens donc :

Du coup les cellules avec l'antigène rond constituent ta solution positive, et les carré, la solution négative.

Tes cellules rondes peuvent être activées par l'anticorps qui se fixe, alors que les carré non car elles ne fixent pas d'anticorps. D'ac ?
Du coup si on peut on préfère avoir des solutions négatives, mais tu comprends que lorsqu'il y a pleins pleins de cellules, il faudrait les anticorps de toutes les autres cellules, donc ca coute super cher.

C'est mieux maintennat?

[Gonzaless']

Ah donc on met sur la surface d'affinité les anticorps correspondants aux antigenes de surface qu'on ne veut pas étudier ? Et ainsi on récupère les antigènes que l'on veut étudier ( puisqu'ils n'auront pas été en contact avec les anticorps de la surface d'affinité ?)

[Mika]

Ah donc on met sur la surface d'affinité les anticorps correspondants aux antigenes de surface qu'on ne veut pas étudier ? Et ainsi on récupère les antigènes que l'on veut étudier ( puisqu'ils n'auront pas été en contact avec les anticorps de la surface d'affinité ?)

En gros oui, mais après tu peux très bien récupérer les cellules de la sélection positive, sauf qu'il y a un risque qu'elles soient activées, de plus tu devra les détacher avec des enzymes qui peuvent léser la cellule.

[Gonzaless']

Ok super
Merci beaucoup beaucoup ! Bonne fin de soirée

[Bittoucell]

Récapitulation

Sélection positive
On cherche à observer des cellules qu'on va appeler X.
On recherche alors un Ag de surface spécifique de la cellule X.
On utilise les Ac tourné contre ces Ag
On récupère donc les cellules qui sont fixées aux Ac.
Problème : L'interaction Ac-Ag risque de modifier l'activation génique au sein des cellules X. D'autant plus qu'en voulant séparer les Cellules X des Ac, on risquera d'apporter encore d'autres modifications. C'et gênant si l'on veut observer des cellules à l'état de repos

Sélection négative
On veut observer des cellules Y
On va alors chercher un Ag de surface qui se trouve sur toutes les cellules de la solution qu'on va utiliser sauf que ces Ag ne doivent pas se trouver sur les cellules Y
On utilise alors ces Ac spécifiques des cellules sauf des cellules Y
Résultat ? Bah quand on récupère le support avec les Ac, on a enlevé toutes les cellules non intéressantes. Il reste, non fixées aux Ac, nos cellules Y. Pas d'interaction avec avec Ac donc cellules au repos !

Voilà : youpi youpi !

[P.U.C]

T'as pas inversé les deux termes par hasard ?

[Bittoucell]

Pas du tout :p
Bon okay, je viens d'éditer !

[P.U.C]

[Gonzaless']

Nickel c'est super clair maintenant !

Merci beaucoup bon week-end !