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(OK) 2 questions: phase G1 réduite; fluorescence


(OK) 2 questions: phase G1 réduite; fluorescence

Messagepar Cécie » 29 Sep 2012, 10:13

Bonjour :fingers-crossed:

Je voulais d'abord savoir si le fait que la phase G1 était réduite pour les CSE leur était une caractéristique propre, ou bien si c'était commun a toutes les cellules souches (ce qui serait logique pour pas induire une différenciation)

Ensuite je ne vois pas la différence entre:
- la visualisation des acides nucléïques par fluorescence induite (HOECHST et DAPI...)
- le FISH

Merci, bonne journée a tous

super les nouveaux émoticons !!!
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Re: 2 questions: phase G1 réduite; fluorescence

Messagepar -Alexis » 29 Sep 2012, 14:43

Coucou cecie !

Pour la phase G1 réduite tu as tout à fait raison et tu as tout compris ! : :D : C'est bien toutes les cellules souches qui ont une phase G1 réduite pour éviter de se différencier.

Fish


C'est une technique pour visualiser une séquence spécifique de l'ADN, pour visualiser un gène en particulier par exemple (et voir où il se trouve dans le noyau, si il bouge...). Donc en labo tu prépares une séquence complémentaire de la séquence que tu veux visualiser et tu accroches un anticorps à cette séquence. Comme ça une fois que ta séquence s'est hybridée avec le gène que tu voulais observer, tu peux faire de l'immunofluorescence indirecte avec des anticorps secondaires 'couplés à un fluorochrome) qui vont reconnaitre l'anticorps (primaire) que tu as préalablement fixé à ta séquence préparée en labo. Sinon tu peux aussi directement foutre un fluorochrome sur la séquence que tu prépares en labo.

Fluorescence induite


Cette technique n'est pas spécifique d'une séquence. Tu ne peux pas visualiser un gène en particulier avec de la fluorescence induite. L'hoescht ou le dapi vont aller se fixer sur tout ton ADN. Cette technique va être utilisée pour repérer des zones où l'ADN est très compacté (fluorescence très intense car beaucoup de ton colorant s'est fixé à une grosse quantité d'ADN dans un périmètre restreint) ou pour repérer des zones où l'ADN n'est pas conpacté.

J'espère que c'est plus clair pour toi, à bientôt !
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Re: 2 questions: phase G1 réduite; fluorescence

Messagepar Cécie » 29 Sep 2012, 16:24

Oui c'est très bien comme réponse :)

Merci beaucoup :bye:
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