(OK) Immunofluorescence indirecte

[Cécie]

Bonjour bonjour, j'ai deux trois petites questions de rien du tout, je pense que vos réponse m'éclaireciront les idées:

- Pour les anticorps mono/poly-clonaux je ne sais pas si j'ai bien compris mais ce que je retiens c'est qu'un anticorps lorsqu'il est seul il est toujours monoclonal = il ne reconnait qu'1 épitope, mais quand on parle d'anticorps polyclonaux on parle en fait d'un ensemble d'anticorps (monoclonaux pour différents épitopes) que l'on retrouve mélanger dans le sérum ?
Est-ce que c'est bien ca? et si oui donc les anticorps monoclonaux sont en fait des anticorps "triés"?

- Qu'est ce qu'un milieu HAT?? je ne vois pas du tout a quoi ca sert dans le processus d'obtention des Ac monoclonaux...

- Et question qui ne concerne pas que l'immunofluorescence mais la fluorescence en général:
Peut-on visualiser une fluorescence sur une molécule si on a pas d'amplification du signal?
J'imagine que non mais je préfère que se soit clair...

Merci bonne journée

[Mika]

Bonjour bonjour, j'ai deux trois petites questions de rien du tout, je pense que vos réponse m'éclaireciront les idées:

- Pour les anticorps mono/poly-clonaux je ne sais pas si j'ai bien compris mais ce que je retiens c'est qu'un anticorps lorsqu'il est seul il est toujours monoclonal = il ne reconnait qu'1 épitope, mais quand on parle d'anticorps polyclonaux on parle en fait d'un ensemble d'anticorps (monoclonaux pour différents épitopes) que l'on retrouve mélanger dans le sérum ? oui, pour moi quand on parle d'anticorps polyclonaux, on parle d'une soupe d'anticorps monoclonaux
Est-ce que c'est bien ca? et si oui donc les anticorps monoclonaux sont en fait des anticorps "triés"? yess !!


- Qu'est ce qu'un milieu HAT?? je ne vois pas du tout a quoi ca sert dans le processus d'obtention des Ac monoclonaux...
C'est un milieu possédant de l'aminoptérine, qui est une drogue qui inhibe la création de l'ADN (en gros le milieu HAT empeche la division cellulaire)

- Et question qui ne concerne pas que l'immunofluorescence mais la fluorescence en général:
Peut-on visualiser une fluorescence sur une molécule si on a pas d'amplification du signal?
J'imagine que non mais je préfère que se soit clair...
Qu'entends-tu par amplification du signal ?
Pour visualiser une molécule fluorescente, tu as juste besoin d'allumer son chromophore en l'excitant par une lumière blanche généralement

Merci bonne journée
Bonne fin de soirée et bonne semaine !!

[Cécie]

Merci pour ta réponse

- Et question qui ne concerne pas que l'immunofluorescence mais la fluorescence en général:
Peut-on visualiser une fluorescence sur une molécule si on a pas d'amplification du signal?
J'imagine que non mais je préfère que se soit clair...

Qu'entends-tu par amplification du signal ?
Pour visualiser une molécule fluorescente, tu as juste besoin d'allumer son chromophore en l'excitant par une lumière blanche généralement

Je parle par exemple dans l'immunofluorescence indirecte vu que pour 1 épitope on a plusieurs ac et que pour ces ac on a plusieurs anti-ac ca fait une amplification du signal.

Si on a pas ce phénomène de démultiplication, d'après toi on visualise quand meme UN chromophore allumé?[/quote]

Merci bonne journée

Bonne fin de soirée et bonne semaine !!

J'adore ces politesssssseeees ....

[Mika]

Oui je pense qu'on peut. Mais on travaille jamais avec 1 seul chromophore allumé, mais un tas de chromophores, donc un tas d'anticorps primaire et secondaires.
Voilou (et dsl du retard)

[Cécie]

okk merci