VP16/lactose heeelp!

[manouchkabaile]

Voila je ne comprends pas du tout cette expérience (avec les 256 sites de fixation et tout). Une petite explication de nos tut'BioC préférés?

Ca se trouve à la fin de la ronéo 11 (du 10/11).

[Margaux]

Bon ben ce que j'ai compris (d'après la ronéo):

- Introduction (à l'intérieur du génome de cellules humaines) 256 sites de fixation de LacI.

- Expression d'une protéine hybride GFP-LacI (la GFP permettant de repérer les endroits où la protéine hybride se lie aux sites de fixation) => on repère la zone fluorescente, qui a une certaine étendue.

- Expression d'une protéine hybride GFP-LacI-VP16 => la zone fluorescente est plus étendue, ce qui signifie que la chromatine est plus décondensée.

Conclusion: les facteurs de transcription (VP16 dans l'expérience) jouent un rôle dans l'état de condensation de la fibre nucléosomale (alors qu'on pensait qu'ils servaient uniquement à stabiliser le complexe d'initiation de la transcription).

(Et même si ce n'est pas mentionné ici, petit rappel: ils jouent ce rôle dans l'état de condensation de la chromatine en fixant des protéines co-activatrices ou co-répressives comme les HAT, les HD ou les HMT dont l'action entraîne une compaction ou une décompaction de la chromatine).

[manouchkabaile]

Merci!