transgénèse dans une cellule animale

[aliizey]

Coucou est ce que quelqu'un pourrait me reexpliquer l'exemple sur la transgénèse dans la cellule animale avec le gene d'actine et PURO (schéma15 du 26/10) parce je comprend pas pourquoi on met un gene resistant à la puromycine dans une cellule qui y est sensible pour etudier le devenir de l'actine
MErciiii

[_Lili_]

tu introduis dans ta cellule 2 gènes : un gène de l'actine (+GFP pour pouvoir suivre l'actine) et un gène PURO (qui est un gène de résistance à la puromycine)
après tu vas mettre les cellules en présence de puromycine, les cellules qui auront bien intégré le gène PURO seront résistantes à la puromycine et ce sont les cellules qui vont te rester, comme tu sais qu'elles ont bien intégré le gène PURO (puisqu'elles ont résisté à la puromycine) c'est qu'elles ont bien intégré le transgène donc elles ont aussi intégré le gène de l'actine. (et après tu pourras étudier le devenir de l'actine dans ta cellule grâce au GFP)

je sai pas si c'est ca que tu voulais savoir, normalement c'est juste ^-^" enfin ca reste qu'une mini explication en attendant celle d'un tut

[aliizey]

En fait le gène PURO nous sert juste à être sûr que la cellule a bien intégrée l'actine ?

[_Lili_]

voilà il te sert à discriminer tes cellules = celles qui ont intégré le transgène et celles qui l'ont pas intégré

[aliizey]

Okey super merciii beaucoup !!!

[Margaux]

D'accord avec Clémy.

[Kapu]

Dsl je reviens sur un vieux sujet mais je ne comprend pas bien pourquoi le fait que la cellule ai bien intégré le gène puro indique qu'elle ai aussi bien intégré le gène de l'actine?

[Margaux]

Tu fais bien d'y revenir si ce n'est pas compris.

Tout simplement parce que le gène hybride (actine-GFP) et le gène de sélection (résistance à la puromycine) sont portés par le même transgène (c'est comme si le transgène était un livre contenant plusieurs recettes: comment fabriquer de l'actine-GFP et comment fabriquer des protéines qui permettront la résistance de la cellule à la puromycine).

Les cellules résistantes à la puromycine ont intégré le transgène (donc aussi le gène d'actine-GFP).

[Kapu]

Oki merci c'est déjà plus clair^^