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spectrometrie de masse et insuline


spectrometrie de masse et insuline

Messagepar manouchkabaile » 06 Nov 2009, 16:17

Je n'ai pas compris le principe de la spectrometrie de masse. Si un tuteur pouvait réexpliquer ça serait très sympa :)

Et en ce qui concerne le cours d'ajourdhui le prof a parlé de la proteolyse de l'insuline. Il a expliqué le déroulement depuis la préproinsuline avec la séquence signal jusqu'à l'insuline mais je n'ai pas bien suivi donc est-ce que quelqu'un qui a compris pourrait faire un petit résumé ?...

Merci beaucoup tout le monde :)
manouchkabaile
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Re: spectrometrie de masse et insuline

Messagepar juju » 06 Nov 2009, 17:17

alors pour le principe de la spectrométrie de masse :
Au cours de son passage dans l’appareil de spectrométrie de masse, la protéine est bombardée par un gaz
de collision neutre (gaz neutre d’helium ou d’argon) il y a alors fragmentation de la séquence de la protéine.Puis par des methodes d'analyse magnetique on recueille es différents fragments de la protéine dont on va déterminés le poids moléculaire qui dépendra des différents AA contenu dans chaque fragment. puis grace a un logiciel informatique et a une banque de donnée, on va pouvoir reconstruire la protéine a partir des fragments et de leur poids moléculaires et ainsi déterminer la sequence en AA de la protéine

pour l'insuline:
dans un premier temps tu as la pré pro insuline constitué de la chaine A la chaine B et du peptide C ainsi qu'une sequence peptidique : la sequence signal
dans le reticulum endoplasmique la molécule perd la sequence signal et deux liaisons disulfures se forment entre les chaines A et B = pro insuline
dans l'appareil de golgi le peptide C se separe des chaines A et B ce qui constituent l'hormone active = l'insuline
je sais pas si mengual vous l'a expliqué exactement comme sa vu que je n'étais pas a son cours...
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Re: spectrometrie de masse et insuline

Messagepar Ludo. » 06 Nov 2009, 17:31

Salut,

Spectrographie de masse : méthode d'étude des molécules (pour nous les protéines) en fonction de leur masse.
Comment ca marche ? :
1) il faut tout scinder la protéine en plusieurs ions. Pour ca il existe plusieurs techniques dont le bombardement par un rayonnement electrommagnétique (les autres : on s'en fout)
2) Une fois qu'on a ces ions, on applique un champ magnétique et on va pouvoir les séparer en fonction de leur masse (et de leur charge)
3) Puis un ordinateur interprète les différents signaux perçus, et élabore un graphe qui nous donne l'intensité du signal en fonction de la masse !

Insuline :
1- le début de la synthèse commence au niveau du réticulum endoplasmique rugueux, avec les ribosomes liés :arrow: pré-pro-insuline (issu directement de la traduction des ARNm) composé :
- d'une séquence signal (qui a permis son adressage au réticulum)
- et de 3 séquences : A, B et C
2-ensuite cette pré-pro-insuline subit dans le réticulum endoplasmique (ou le golgi) 2 phénomènes :
- clivage de la séquence signal
- formation de ponts disulfures entre les séquence A et B
:arrow: on obtient ainsi la pro-insuline
3-La pro-insuline continue de transiter dans les différentes vésicules (RE, et golgi) et arrive au niveau des vacuoles de sécrétion (cf bioC) où se fait le clivage de la séquence C !
:arrow: On obtient ainsi l'insuline : séquence A + séquence B reliées entre elle par des ponts disulfures

je te joins un petit schéma pour mieux comprendre

Bonne soirée
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Re: spectrometrie de masse et insuline

Messagepar manouchkabaile » 06 Nov 2009, 18:43

Ok c'est plus clair mais du coup pour la spectro de masse le polypeptide est bombardé par un gaz de collision ou par un rayonnement electromagnétique ?

Et autre question : est-ce qu'il faut connaitre toutes les formules de tous les monosaccharides par coeur ?
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Re: spectrometrie de masse et insuline

Messagepar Ludo. » 06 Nov 2009, 19:32

On t a dit qu'existé plusieurs techniques pour ioniser donc...

Oui faut connaitre tous les monosacch
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