Extraction ARN

[louisher]

Bonjour !

Ronéo 2, p.16 : On ne mentionne pas l'utilisation de l'EDTA alors que Ronéo 1, p.3, ils disent que c'est une étape commune à l'ADN et l'ARN ...
Je suppose qu'on utilise aussi l'EDTA pour l'ARN ?

Par curiosité, il est dit (pour l'ADN) qu'on lyse les GR avec une solution hypotonique.
Puis on dit (pour l'ARN) qu'on utilise du Thiocyanate de Guanidium.

Etant donné que les 2 premières étapes à l'extraction d'ARN et d'ADN sont communes (d'après la ronéo), je suppose qu'on utilise ce Thiocyanate de Guanidium pour l'ADN aussi ?

Merci !

EDIT: j'en profite pour rajouter une question :

Pour former la méduse, on utilise de l'éthanol froid à -20 dégré je suppose que c'est -20°C
Pour le rinçage, on utilise de l'éthanol à 70 degré je suppose de c'est la teneur en alcool de 70° (et non la température ...) ?

[Kardajian]

Salut Louisher !

Pour commencer, oui l'extraction d'ARN se fait aussi sur EDTA ^^

Par curiosité, il est dit (pour l'ADN) qu'on lyse les GR avec une solution hypotonique.
Puis on dit (pour l'ARN) qu'on utilise du Thiocyanate de Guanidium.

Etant donné que les 2 premières étapes à l'extraction d'ARN et d'ADN sont communes (d'après la ronéo), je suppose qu'on utilise ce Thiocyanate de Guanidium pour l'ADN aussi ?

Je me suis jamais vraiment posé la question, mais après quelques recherches, il semblerait qu'on peut aussi utiliser le thiocyanate de guanidium dans l'extraction d'ADN ^^

Pour former la méduse, on utilise de l'éthanol froid à -20 dégré je suppose que c'est -20°C
Pour le rinçage, on utilise de l'éthanol à 70 degré je suppose de c'est la teneur en alcool de 70° (et non la température ...) ?

Oui c'est bien ça :

- Pour la méduse : éthanol à 95° (teneur en alcool) à une température de -20°
- Pour le rinçage : éthanol à 70° (teneur en alcool)

C'est bon pour toi ?

[louisher]

Nickel merci !