Ronéo 2012 n°2 introduction de molécules fluorescentes

[Raboucho]

Salut

Désolé si la question a déjà été posé l'année dernière mais j'ai pas trouvé avec la fonction recherche

Un fluorochrome est greffé à la molécule étudiée et va s'associer dans la cellule à la molécule étudiée.

Il y aurait pas un beug là par hasard ?

Merki

[♦MC♦]

Yep, j'ai aussi bugué avec ça :

- Soit ils évoquent de manière indirecte la greffe du fluorochrome à la protéine d'intérêt suite à l'intégration du gène codant pour la GFP au génome (pour former le gène hybride GFP-X), et dans ce cas pas de soucis.

- Soit ils évoquent l'introduction directe de fluorochromes, (c'est ce qui semble être sous-entendu, et que j'ai vu sur d'autres supports...), et ça voudrait dire que les fluorochromes sont spécifiques de la molécule d'intérêt (perso, j'aurais dit que des fluorochromes introduits comme ça vont : soit s'amouracher de toutes les molécules qu'ils rencontrent, soit baigner dans le cytoplasme... et dans tous les cas, la cellule est toute fluorescente (sauf si les fluorochromes ne passent pas l'enveloppe nucléaire, auquel cas le noyau reste célibataire !)) ou sinon on introduit des fluorochromes directement couplés à des Ac 2ndaires eux mêmes couplés à des Ac primaires...

Je crois que j'avais déjà posé une question du type "Est-ce qu'on veut vraiment nous faire comprendre qu'il existe des fluorochromes spécifiques d'une molécule et qu'on injecte directement" sur le tchat...mais je m'en souviens plus

Bref, mon intervention est inutile, mais au moins je vous ai fait un peu de lecture .

[chloe]

Hum... effectivement, je pense qu'il voulait dire que la GFP était greffé à la molécule et ensuite intégré dans la cellule

[chloe]

mais après MC sur les schémas y a marqué molécule , donc je pense qu'il sont déjà greffé aux molécules et ensuite introduit dans la cellule

[♦MC♦]

Les fluorochromes sont eux-mêmes des molécules ! Mais je pense que ton idée est la bonne, je crois que tu me l'avais déjà dit... mais pour associer des fluorochromes aux molécules d'intérêt, faut quand même : soit des Ac, soit qu'on ait greffé la GFP sur une autre cellule pour ensuite recueillir les protéines hybrides (ce 2nd choix n'aurait aucun sens à mes yeux XD)

[chloe]

oui mais dans le sens "molécule" qui va avec la phrase plus haut ^^ soit on utilise des AC spécifique de la molécule à étudier soit on extrait nos molécules puis on greffe un marqueurs et on réinjecte dans la cellule ou peut-être que les fluorochromes peuvent-être spécifique de la molécule à étudier. je pense qui y a plein de possibilité mais pour l'instant je trouve rien sur ce type de marquage

[chloe]

mais je pense quand même qu'ils doivent extraire les molécules puis qu'ils leur greffent un fluo et ensuite ils les réinjectent dans la cellule

[♦MC♦]

Quand tu dis greffé, c'est genre "greffé greffé" ?

[Raboucho]

Ca y est, je crois que je viens de comprendre ^^

On greffe le gène de la GFP avec le gène de la molécule à étudier, puis on crée cette molécule hybride (molécule à étudier + GFP), puis on l'injecte dans la cellule pour étudier son comportement

Si c'est pas ça, je crois que j'vais pété un cable

[chloe]

Oue ca serait possible mais le soucis c'est qu'on peut directement faire à la cellule la molécule. donc on en revient à la transgénèse de la GFP

[Raboucho]

Ok, mais dans cette partie il parle de faire entrer les macromolécules dans les cellules... Donc sous entendu qu'elles sont déjà fluorescente non ?

[chloe]

A mon avis elles sont déjà fluo... mais après comme je disais peut-être qu'il y a des fluo spécifique de certaine molécule

[Raboucho]

Ok, c'est bon pour moi
Merki