eléctrophorèse

[Sarahikeni]

Coucou
Je viens de m'embrouiller ... Je pensais que l'éléctrophorèse n'était seulement QUE pour les protéines (et pas ADN, ARN)
mais on le fais aussi pour ADN et ARN ?

[Gollume]

Coucou !

Je viens de m'embrouiller ... Je pensais que l'éléctrophorèse n'était seulement QUE pour les protéines (et pas ADN, ARN)
mais on le fais aussi pour ADN et ARN ?

Effectivement tu t'es bien embrouillée lol ! pas de soucis, un petit récap ne fait pas de mal!

L'électrophorèse est utilisée à la suite d'une amplification par PCR-classique, pour vérifier qu'il n'y a pas eu de contamination.
En effet tu place tes fragments d'ADN amplifiés dans les puits et tu les laisse migrer sur le gel d'agarose/ d'acrylamide en fonction de leur taille, de haut en bas, du - vers le +, visibles par fluorescence.

L'électrophorèse est utile à la suite d'une PCR-RFLP (utilisant des enzymes de restriction) pour établir un diagnostic (cas typique des exercices pour le diagnostic d'achondroplasie avec les enzymes de restriction)

L'électrophorèse pour les ARN se fait dans le cadre du Northern-Blot pour étudier l'expression du gène dans cadre d'une transfection eucaryote. Ce gel d'électrophorèse est dénaturant (contrairement au gel de l'électrophorèse pour l'ADN),car l' ARN étant simple brin, il a tendance à vouloir se refermer sur lui même le coquin ... Dans ce cas les fragments d' ARN sont également séparés en fonction de leur taille avant d'être transférés sur une membrane ! (cf ronéo 2)

L'électrophorèse pour les protéines est utilisée dans le cadre du Western-blot (cf ronéo 2). Ici le gel d'acrylamide est différent de celui utilisé pour les acides nucléiques

Est ce que c'est bon, tu es d'accord avec tout ca ?

Aller plein de courage, c'est la dernière grosse journée !! Vendredi sera un jour nouveau !!
On pense fort à toi, ne panique pas, tout va bien se passe