Reverse transcriptase

[TORRM]

hello!

Voilà lors de la préparation de l'ADNc à partir de l'ARNm on utilise la reverse transcriptase

On nous parle d'amorce (succession de T), mais cette amorce d'ADN appartient à la reverse transcriptase (il me semble) ou non et on la rajoute dans la préparation ??

Pour moi elle appartient à la reverse transcriptase car il me semble que la transcriptase n'utilise pas de primer et est donc non spécifique

merci d'avance!!!

[Sow~]

Coucou!

Normalement, c'est obligé d'avoir une amorce pour débuter la synthèse du brin complémentaire, même pour la Reverse Transcriptase.
Et aussi je crois que le primer peut être une simple séquence poly-T, mais dans certains cas, ça peut aussi être une amorce spécifique de notre ARN d'intérêt par exemple, donc je pense que c'est pas quelque chose qui fait partie de la Reverse Transcriptase, mais que l'on rajoute pour que la synthèse puisse débuter...

Sur cette diapo, on peut voir qu'on ajoute une amorce au début de la synthèse, avant de rajouter la Reverse transcriptase!

J'espère que c'est bien ça et que ça répond à ta question

[TORRM]

Merci beaucoup Sow !!

En fait c'était dans mes notes, et dans une phrase de la ronéo de l'année dernière, je te la met :

"la reverse transcriptase incorpore les nucléotides un peu comme la polymérase sauf qu'à la différence de la polymérase elle fonctionne comme une matrice et n'a pas besoin de primer , il suffit d'une succession de T qui par complémentarité vont aller s'hybrider sur la queue poly A de l'ARNm"

Alors je l'avais surement mal interprété, je pensais que la reverse avait une succession de T qui lui permettais de s'hybrider sans amorce.
(un peu genre la télomérase qui possède son propre brin matrice pour s'hybrider )

Mais c'était surement dit dans le sens, vu que l'amorce est juste une succession de T c'est pas un "vrai primer" .
Donc tu as surement raison et puis le schéma est explicite

J'attend juste la conf d'une tut pour être sur, mais je te remercie beaucoup pour ton aide!!

[Chloette]

+ 1 !

[Sow~]

Ah oui, dans la ronéo de l'année dernière, il y avait cette phrase et pas d'erratas dessus... Bizarre
Bon ben comme tu l'as dit, attendons l'avis d'une tutrice! Comme ça on saura la bonne version à retenir!

[Gollume]

Hola

Alors en fait dans le forum d'ue11 de l'année dernière il y'a une section "réponses des professeurs" et voici ce que la tutrice avait envoyé comme question ainsi que la réponse:

Reverse transcriptase

Concernant la reverse transcriptase, en cours vous avez dit que :
La reverse transcriptase incorpore les nucléotides un peu comme la polymérase sauf qu’à la différence de la polymérase, elle
fonctionne comme une matrice, elle n’utilise pas de primers
Dans le poly, il est marqué : Elle possède une activité 5’ 3’ ADN polymérase à partir d’une amorce ADN hybridée sur l’ARN.
Cela veut-il dire qu'il n'y a pas besoin d'amorce ADN spécifique pour la Reverse Transcriptase ?
Que doivent-ils retenir ?

La reverse transcriptase synthétise un brin d'ADN à partir d'une matrice ARN et d'une amorce ADN. Cette amorce peut etre n'importe quel fragment d'ADN simple brin hybridé sur un ARN simple brin.
La différence donc avec une ADN polymérase c'est le fait que la reverse transcriptase utilise l'ARN comme matrice et non l'ADN comme l'ADN polymérase.

Voiloi j'espère que ca repond à votre question
Bonne fin de journée et désolée pour le délai d'attente ...

[Sow~]

Okay mercii

[TORRM]

Parfait merci beaucoup !