PCR

[mariieyep]

Coucou j aimerais savoir si il y a une différence entre PCR-RFLP et PCR-sequançage ?

[Chloette]

+ moi

[Sow~]

Coucou!

Une PCR-RFLP, c'est juste une PCR classique, donc sans le séquençage.
viewtopic.php?f=474&t=54940&p=321127&hilit=RFLP#p321127

[Avendil]

Coucou!

Une PCR-RFLP, c'est juste une PCR classique, donc sans le séquençage.
viewtopic.php?f=474&t=54940&p=321127&hilit=RFLP#p321127

A priori non vu que R3p1 il dit "PCR - RFLP = PCR suivie d'une digestion enzymatique et confirmation par séquençage"

[Sow~]

Ah bon?
J'avais toujours pensé qu'une PCR-RFLP comprenait seulement la réaction PCR elle-même (Dénaturation, Hybridation, Élongation) + Digestion par des enzymes de restriction + Séparation des fragments par Électrophorèse...

Bon ben attendons le passage d'une tutrice alors, pour avoir la bonne version à retenir

[Avendil]

C'est ce dont je me souvenais aussi, d'où ma déconvenue.

[Gollume]

Salut à vous

Coucou j aimerais savoir si il y a une différence entre PCR-RFLP et PCR-sequançage ?

Oui il y'a une différence entre PCR-RFLP et PCR-séquençage.

PCR-RFLP: on utilise les enzymes de restriction sur une électrophorèse. (comme dans le cas de l'achondroplasie (ronéo 1 page 6). Ces enzymes ont la particularité de couper l'ADN partout où elle détectent une séquence de nucléotides SPECIFIQUES. C'est a dire qu'on cherche une mutation déjà connue. Si l'enzyme X coupe, on saura quel est l'enchainement de la séquence nucléotidique sans faire de séquençage.

PCR-séquençage: c'est la détermination directe de la succession de nucléotides qui composent la séquence d'ADN étudiée. On ne connaît pas la mutation à la base, on cherche à savoir ce qui s'est passé, et non à vérifier.


NB: la "PCR classique", c'est quand on amplifie l'ADN initial, en opposition à l'amplification de l'ADN complémentaire obtenu après l'action de la reverse transcriptase au niveau de l'ARNm.
La PCR est une réaction à but unique d'amplifier une région d'ADN.

C'est donc un petit lapsus de la ronéo effectivement
J'espère que ca va pour vous

[Sow~]

Merci beaucoup pour ces explications!!!

[mariieyep]

D'accord merci pour ta réponse !