Qcm 8

[Mendel]

Salut , alors voila j'ai absolument rien compris a ce QCM puis je avoir une explication SVP , merci d'avance !
A) je pensais que c'etait 5' a cause de l'etiquette qu'on met en NH2
B) dans la roneo on dis qu'il faut absolument enlever le codon stop et eventuellement enlever le condon ATG

Voila voila

[Da_Chivers]

Yop moi aussi une petite explication serait cool ! merci

[melilou]

je veux bien une petite explication please

[Snape]

Yo !
L'extrémité 5' de l'ADNc (qui correspond à l'ARN) code pour la l'extrémité N-term de la protéine et l'extrémité 3' pour la partie terminale (C-term).
Si vous voulez mettre votre étiquette en N-term de la protéine (au début en gros) il faut enlever le codon initiateur (ATG) pour que votre étiquette soit traduite..
Par contre si vous voulez mettre votre étiquette en C-term faut enlever le codon stop pour que la traduction se termine après l'étiquette
C'est mieux ?

[Mendel]

Oue super merci mais je comprend toujours pas pourquoi c'est pas 5' puisqu'on nous dis qu'on le met en N-Term

[Snape]

Bah justement l'ADN est à l'extrémité 3' de l'étiquette

[Azula]

Hola

Alors j'ai choisi de vous mettre ce qcm, de 1) parce qu'on s'attends pas forcement à avoir un qcm sur cette toute petite partie du cours et de 2) pour que vous vous rendiez compte que les profs aime la réflexion car ce n'est clairement pas dit comme ça dans le cours.

Voici la correction que j'aurais aimé que vous ayez mais cafouillages à l'impression

A) Vrai, une protéine est orienté dans le sens N-term/C-term. et l’ADN dans le sens 5’-3’. Si on veut placer un tag en Nterm de la protéine, il faut placer l’ADNc de la protéine X en 3’ de l’étiquette = étiquette en 5’ de l’ADNc
B) Vrai, si on veut placer un Tag en N-term il ne faudra pas oublier de retirer le codon start ATG de la protéine X.
C) Faux
D) Vrai, voir B

Ce qu’il faut retenir pour les étiquettes (Tag) :
 elles sont placées en 3' ou 5' des sites de multiclonage
 elles permettent de visualiser la protéine d'intérêt dans la cellule
 protéine de fusion = cDNA d’intérêt + étiquette (« Tag »)
 si le Tag est en C-term de la protéine X, il faudra pas oublier de retirer le codon STOP à l'ADNc d'intérêt de manière à ce que la traduction de la protéine ne s'arrête pas juste avant le tag, sinon comment suivre la protéine dans la cellule ?
= ADNc en 5' du Tag = Tag en 3' de l'ADNc
 pareil si le tag en N-term de la protéine X, retirer le codon START (ATG) de l'ADNc
= ADNc en 3' du Tag = Tag en 5' de l'ADNc
E) Faux

Est-ce que déjà vous comprenez mieux ?
Si non je vous réexplique car dès que vous aurez compris ça, ce sera un jeu d'enfant pour vous en sortir par la logique le jour du cc si ça tombe évidemment

Biomoléculairement votre

[Mendel]

Oue super merci , par contre je pensais que c'etait pas obliger d'enlever le condon initiateur , c'etait juste preferable de le faire , on est donc vraiment obliger ?

[Azula]

Yep bien que ce ne soit pas flagrant dans la ronéo, ce qcm le confirme et quoide mieux que la diapo pour enlever le moindre doute

Regarde au niveau de mes flèches jaunes tu vois bien que la méthionine = M = acide aminé du codon START a été retirée si tag en N-term.

Si il y a d'autres questions n'hésitez pas

Bonne soirée

[Mendel]

Oue merci , j'avais juste vu je sais plus ou , peut etre dans les cours des années d'avant que quand on mettait notre Tag en N-term c'etait Preferable d'enlever le codon start !
Mais bon je retiendrait qu'on l'enleve tout le temps , merci bien