test de complémentation biocell

[felindra]

Bonjour à tous !!!

Svp pouvez vous " m'éclairci r" sur le test de complémentation en biocell ???
Je comprends pas trop le principe mais surtout comment on arrive à obtenir 2 groupes de complémentation distincts
Merciii bcp d'avance j'attends vos reponses avec impatience haha

[Lamellipode]

Hey !

Je vous ai concocté de magnifique fiches disponibles librement dans "CENTRE de TELECHARGEMENT" sur les tableaux de complémentation (il y a une fiche sur la complémentation dans les fiches de la tut' rentrée aussi).

Voici l'extrait de la fiche sur la complémentation :

La complémentation : c'est l'habilité à restaurer une fonction de gène en combinant dans une même cellules deux gènes dont au moins un est muté.
Donc il est impératif que l'allèle muté soit récessif pour être complémenter.

1) Première étape : test de récessivité
Test de complémentation possible SI et SEULEMENT SI la mutation est récessive. (si elle est dominante, il sera impossible de restaurer une fonction avec un allèle sain).
Le test : On insère dans une cellule (pour le même gène) un allèle sauvage et un allèle muté. Si le phénotype devient sauvage alors la mutation est récessive, si le phénotype devient muté alors c'est la mutation qui est dominante.

2) Test de complémentation
Objectif : déterminer si deux mutations appartiennent au même gène. Il faut pour cela combiner les deux mutations dans un organisme diploïde et établir l'allélisme entre les deux mutations :

Expérience :
On a une cellule A m1-M2 qui produit la protéine M2 mais pas m1
On a une cellule B M1-m2 qui produit la protéine M1 mais pas m2
On obtient d'abord un hétérocaryon puis un hybride avec une cellule m1-M1 et M2-m2.
La fusion des noyaux est appelée : hybride avec l'ADN des deux cellules.

On peut dès lors observer deux cas de figures :
Phénotype sauvage
ou
Phénotype muté

Si Phénotype sauvage :
-Chacune des mutations a été COMPLÉMENTÉE par un allèle sauvage.
- Le M2 de la cellule A est allé complémenter le m2 muté de la cellule B.
- Le M1 de la cellule B est allé complémenter le m1 muté de la cellule A.

Comme les mutations sont récessives, elles ne s'expriment pas. Le phénotype est donc sauvage.
On a DÉMONTRER que les mutations appartiennent à DEUX groupes de complémentation différents.
On SUGGÈRE que les mutations ne sont pas allèles (donc deux gènes différents en jeu).
(pourquoi suggère ? Voir ci-dessous)

Si phénotype muté :
- Dans l'hétérocaryon, les mutations s'expriment, elles n'ont PAS été complémenté.
- Pas de phénotype sauvage → muté.

On a DÉMONTRER que les mutations appartiennent au MÊME groupe de complémentation.
On a DÉMONTRER que les deux mutations sont allèles.

Pourquoi suggère-t-on dans le premier cas ?

En admettant que chacune des mutations est en mesure de créér deux morceaux complémentaires d'une protéine si elles s'expriment toutes les deux, la protéine résultant devient saine et complète, le phénotype peut s'exprimer normalement !
A la base se sont deux mutations récessives qui seules ne forment qu'un morceau incomplet de protéine, non utilisable.
Donc : la réunion de ces deux mutations récessives rétablissent le phénotype sauvage.
La complémentation a donc bien lieu alors que les mutations SONT allèles.
C'est un cas exceptionnel, c'est la suppression intragénique.

Récap :
Phénotype sauvage = il y a eu complémentation
→ DÉMONTRE 2 groupes de complémentation
→ SUGGÈRE pas allèles

Phénotype muté = il n'y a pas eu complémentation
→ DÉMONTRE même groupe de complémentation
→ DÉMONTRE allèles du même gène

N'hésite pas à consulté les fiches toutes belles

Bonne continuation