Concernant l'amplification clonale, dans la fiche, on nous dit que :
Extraction de l'ADN recombinant par lyse alcaline, dénaturation, neutralisation, précipitation des protéines et de l'ADN bactérien puis précipitation de l'ADN plasmique.Et d'après un ancien post :
Lorsqu'on isole l'ADN d'une cellule procaryote, on récupère à la fois l'ADN génomique et l'ADN plasmidique. On peut isoler spécifiquement le plasmide en appliquant la méthode de "lyse alcaline". On DENATURE les ADN en présence de NaOH et de SDS. On ramène ensuite le pH à la neutralité pour RENATURER les ADN -> Durant cette étape, l'ADN plasmidique va se renaturer + vite que l'ADN génomique car il est beaucoup + petit et + compact. L'ADN génomique va alors précipiter avec les protéines en présence de SDS. Après centrifugation, on pourra récupérer le surnageant qui contient le plasmide.Du coup, au final, ne serait-il pas faux de parler de précipitation de l'ADN plasmidique, étant donné qu'on le récupère au niveau du surnageant et qu'on l'étudie par séquençage ?
Merci beaucoup d'avance !
