Immunofluorescence indirecte

[Mahonne.A]

Bonsoir

J'avais une question sur un point ou c'était pas très clair pour moi.
Je voulais savoir si les anticorps primaires vont bien se Fixer sur le fluorochrome qui lui c'est déjà fixé à la protéine graçe à l'une des méthodes évoquées à la page 5-6 de cette ronéo.

Merci

[PepL]

Bonjour !

Immunofluorescence indirecte consiste à reconnaitre une protéine d'intérêt via des anticorps marqués à u fluorochrome.
Le montage est le suivant :
1 - Un Ac primaire reconnait un antigène à la surface de ta protéine d'intérêt
2 - Un Ac secondaire couplé à un fluorochrome, reconnait l'Ac primaire (voir au dessus)
3 - Il y a donc amplification du signal et tu peux donc visualisr la localisation de ta protéine d'intérêt.

Bon pour toi ?

Bon courage et bonne journée !

[Mahonne.A]

Donc la proteine présente des épitopes spécifique à l'anticorps ?
et ce que je comprenais pas c'est que dans la ronéo on nous dit que les 2 fluorochromes doivent être de couleurs différentes mais pour moi il n'y a qu'un seul fluorochrome qui provient des anticorps secondaires.

Merci

[PepL]

Ta protéine porte a sa surface différents antigènes eux même formés de différents épitopes ; ces derniers seront reconnus spécifiquement par des anticorps (monoclonaux si ils ne reconnaissent spécifiquement qu'un épitope d'un antigène).

Et en effet, il est important quand tu veux différencier et distinguer 2 protéines différents d'utiliser 2 fluorochromes de couleurs différentes (que tu greffes a tes Ac secondaires), pour pouvoir avoir une couleur pour chacun de tes protéines.

C'est bon pour toi ?

[Mahonne.A]

Ah c'est bon j'ai tout compris merci