Roneo 2 clonage page 12-13

[Mélanoblaste]

Bonjour voila, je ne comprend pas à quoi sert le clonage. Quel est l'intérêt d'amplifier nos gènes pour pouvoir les lirent séparément ? Et comment passer de la boîte de pétri à la séparation des deux ADNc ?
Merci !

[Luffylink]

Salut

Une fois la sélection blanc - bleu réalisée, tu connais les colonies de bactéries qui ont intégré l'insert.
Cependant, parmi ces inserts, se trouvent mélangés les séquences paternelle et maternelle, et tu ne peux les différencier. De plus, la quantité d'ADN est insuffisante pour être utilisable.

On va donc sélectionner les colonies bleues sur la boîte de pétri portant lesdites séquences et les placer dans des tubes à essais séparés et différents
On amplifie alors cette seule colonie de bactérie dans le tube afin d'obtenir une quantité plus acceptable d'ADN d'une seule séquence

C'est plus clair ?

[Mélanoblaste]

Oui merci mais ne comprends pas pourquoi les fragments ne sont pas séparer des la PCR ?

[louuu]

salut, je m'en rajoute parce que je n'ai pas très biens compris comment à partie du moment où on a éliminé les bactéries sans le gène de résistance, on arrive à séparer nos 2 ANDc juste en repiquant les différentes colonies ...? désolée si c'est pas très clair

[Luffylink]

Je vais poser la question demain au prof, pour demander un éclaircissement sur ce point

Il y a sur ce post une question assez similaire.
Pouvez vous vérifier si vos interrogations se rejoignent ?

[louuu]

oui c'est ça: pourquoi ils ne sont pas directement spearés après la PCR