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Centrifugation différentielle

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Centrifugation différentielle

Messagepar Nom_de_Zeus! » 25 Aoû 2016, 19:39

Hey ! :)

A propos de la centrifugation différentielle, j'ai lu dans la fiche qu'on isolait les polyribosomes à 100 000 G, mais on les retrouve aussi dans la fraction obtenue après 300 000 G...
Et sur la photo du diapo, il est écrit qu'on obtient les polyribosomes à 100 000 G et les polysomes à 300 000 G, or je pensais que polysome = polyribosome = un ensemble de ribosomes accrochés en même temps au même ARNm, du coup comment on peut les isoler dans deux phases différentes?

Et comme tout ça m'a donné un gros doute, je me demandais si après centrifugation à 300 000 G on isole bien des ribosomes tous seuls (donc non accrochés à un ARNm)

Voilà merci de m'éclairer :wink2:
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Re: Centrifugation différentielle

Messagepar Striker spirit » 04 Sep 2016, 14:09

Hey ! :)

Dans un premier temps, nous confirmons que les polyribosomes (ou polysomes, ce sont bien des termes synonymes :wink2: ) peuvent être obtenus lors de la phase d'ultra-centrifugation à 100 000 G ET dans la phase d'ultra-centrifugation à 300 000 G

les polyribosomes sont bien des ribosomes accrochés à un ARN messager, mais il existe une grande variété d'ARN messagers de tailles très différentes ! Un polyribosome "long" composé d'un ARN messager possédant des milliers de nucléotides avec des centaines de ribosomes fixés sur celui-ci pourra sédimenter dès la première phase d'ultra-centrifugation (100 000G, 1 heure) alors qu'un polyribosome "court" composé d'un ARN messager possédant quelques nucléotides ainsi qu'un ou deux ribosomes attachés nécessitera une plus grande force centrifuge pour sédimenter, et sera prélevable à la fin de la deuxième étape d'ultra-centrifugation (300 000G, 2 heures).

Deuxièmement, les ribosomes simples étant de minuscules formations ribonucléoprotéiques (Protéines+ ARN) ils sont bien obtenus lors de la dernière phase d'ultra-centrifugation à cause (ou grâce, as you want. :P ) de leur faible taille.

C'est mieux comme ca ? :glasses-nerdy:

En espérant t'avoir aidé

(PS: je réponds sous peu à votre question sur la centrifugation isopycnique)
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Re: Centrifugation différentielle

Messagepar Nom_de_Zeus! » 05 Sep 2016, 12:22

Super merci je n'avais pas vu les choses comme ça ! :glasses-nerdy:
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