billes magnetique

[Rahma]

Bonjour
en fait je comprend pas à quoi serve les billes magnétiques de polyT dans le séquençage du transcriptome ..
tout ce que j'ai compris c'est qu'ils vont s'hybrider avec la séquence PolyA mais pourquoi?
et après il disent que les billes magnétique vont être isoler à l'aide d'un aimant (est ce qu'il parle des billes hybridé ou des billes toujours libre? )
merci d'avaance

[yaya06]

Bonjour,

en fait le but de l'expérience est de séparer nos ARNms des autres ARN qui eux dispose d'une queue poly-A.
Donc:
1) On dipose nos billes magnétiques où sont disposés des séquences Poly-T qui s'hybride avec les queues poly-A des ARNm que l'on veut séquencer.
2) Puis on isole les billes magnétiques avec un aimant (les billes magnétiques sont attirées par l'aimant)
3) On libère les ARNm accrochés sur les billes magnétiques et on réalise une transcription inverse permettant d’obtenir des ARN complémentaires correspondant aux séquences d’ARNm.
4) On passe ensuite en NGS pour obtenir les séquences.

J'espère que c'est plus clair pour toi