Microtubules

[c.khl]

Salut, je rencontre souvent le terme de "purifier" notamment dans une des expériences permettant l'identification et caractérisation des moteurs (pour les microtubules) mais je ne comprends pas trop ce que ça veut dire, par exemple "purifier des vésicules", merci d'avance!

[c.khl]

D'ailleurs est-il possible d'avoir une petite explication complémentaire sur cette longue expérience svp parce que je n'arrive pas à la comprend, merci

[luciférase]

Salut

Pour ta première question, purifier ça veut dire isoler en quelques sortes. Pour l'expérience d'identification des moteurs des microtubules, le prof dit qu'on purifie une vésicule, ça veut dire tout simplement qu'on l'a récupérée depuis une cellule en enlevant tout ce qu'il y a autour pour ne se retrouver qu'avec cette vésicule et l'introduire dans notre expérience. Un exemple un peu wtf mais parlant, si t'as fais une ratatouille et que tu veux "purifier" un bout d'aubergine, tu le récupères dans ta ratatouille et tu l'isoles de tous les autres légumes. C'est seulement ça !

En ce qui concerne ta deuxième question je vais essayer de te faire un récap rapide de l'expérience :

Les chercheurs ont combiné dans une expérience des microtubules (assemblés in vitro) avec des vésicules synaptiques. Ils ont aussi mis de l’ATP. Ils essaient de savoir si ça suffit à faire se déplacer la vésicule sur le microtubule, mais ça ne fonctionne pas, la vésicule ne se met pas en mouvement, il manque donc quelque chose.

Ensuite, on reprend la même expérience mais en ajoutant cette fois-ci un extrait de neurone (on prend juste un extrait de cytoplasme dans un neurone en fait). Pourquoi on fait ça ? En fait on suppose qu’à l’intérieur d'un extrait de neurone, il y a bien une molécule qui va permettre à la vésicule de se déplacer sur le microtubule, puisque dans un neurone il y a une forte activité de transport microtubulaire.
Cette fois-ci ça fonctionne bien, mais bon on est pas très avancés, on ne sait pas quelle est la molécule contenue dans l’extrait de neurone qui a permis à la vésicule de se mettre à se déplacer sur le microtubule.

Du coup, on reprend la même expérience que ci-dessus avec l’extrait de neurone, mais au lieu de mettre de l’ATP on y met de l'AMP-PNP. C'est un analogue de l'ATP qui a pour particularité de ne pas s’hydrolyser. Du coup, on aura bien la fixation de la vésicule sur le microtubule comme si elle allait se déplacer (grâce à la molécule encore inconnue présente dans l’extrait de neurone) mais le déplacement ne se fera pas car il n’y a pas d’ATP pour permettre le mouvement. La structure va se stabiliser.

Au final il a suffit de purifier (l'isoler de tout le reste) cette molécule qui permet l’assemblage de la vésicule sur le microtubule (le prof ne détaille pas du tout le processus de purification mais on s'en fiche) : on découvert la kinésine. Et par la suite on a découvert la dynéine selon le même principe.

La prochaine fois quand tu as plusieurs questions fais plusieurs post stp ce sera plus lisible pour tout le monde

C'est bon pour toi ?

[c.khl]

Oui merci beaucoup, tes explications sont très claires à chaque fois!