roneo 2 page 6

[shayjs]

salut dans la ronéo 2 de l'an dernier page 6 il y a une partie qui me pose problème, au niveau des exemples de résultats pour le séquençage sanger, je comprend pas pourquoi c'est dit que lorsqu'il y a la présence de deux fragments différent de même taille sa témoigne d'un variant hétérozygote, pourquoi hétérozygote et ps homozygote ? Et je me demander par la même occasion si il y avait un rapport avec le premier cours qui nous dit que lorsqu'il ya deux bande c'est homozygote et lorsqu'il y a trois bande c'est hétérozygote ? merci d'avance

[Tristampax]

Bien le bonjour jeune camarade ! Hugodzilla m'a autorisé/demandé de te répondre car il n'avait pas la ronéo sur lui là tout de suite, et il ne voulait surtout pas laisser ses fans de Biomol sans réponse !

Pour ta première question : Dans le cadre d'un séquencage avec la méthode Sanger, si on retrouve deux fragments sur la même ligne cela signifie que le patient possède une séquence nucléotidique différente sur ses 2 brins/chromosomes. L'un des deux est muté au niveau du nucléotide possédant deux versions sur l'éléctrophorèse. Le brin muté et le brin "sauvage" font la même taille, donc ils migreront à la même distance.
Si d'habitude on a toujours un seul fragment par ligne c'est parce que en général on a les mêmes séquences sur les deux chromosomes.

Pour ta deuxième question : Dans le premier cours, l'histoire des 2 bandes/3 bandes comme tu dis est plutôt à distinguer de ta première question, car on y utilise des enzymes de restriction spécifiques d'une mutation, causant l'apparition de plusieurs fragments de différentes tailles sur l'éléctrophorèse !

Petit rappel pour que tout soit clair : (On raisonne avec le cas de l'achondroplasie)

3 cas sont alors possibles :
1) Un patient homozygote non muté : ses deux brins ne possèdent pas la mutation donc les enzymes de restriction ne couperont pas le brin, et celui ci ne laissera apparaitre qu'un seul fragment sur l'éléctrophorèse

2) Un patient homozygote pour la mutation : les deux brins sont mutés et seront digérés (coupés en deux) par l'enzyme de restriction donc il apparaîtra deux fragments sur l'électrophorèse (2 fragments plus léger donc qui migreront plus loin que dans le premier cas)

3) Dernier cas le patient est héterozygote pour la mutation : Un brin est muté l'autre ne l'est pas, le brin muté sera coupé formant deux fragments et l'autre brin non muté ne sera pas coupé donc encore un fragment mais de plus grosse taille -> ce qui nous donne au final les 3 fragments de l'électrophorèse !

Dis moi si j'ai éclairci tes doutes, et si tu as d'autres questions n'hésite surtout pas !

[Hugodzilla]

ouaw quelle belle réponse

Nany c'est trop un coeur