par nenyan » 04 Sep 2011, 11:04
Salut, alors pour ce QCM, dans mes annales, le peptide est K-L-D-H, mais bon ça ne change rien, l'hydrolyse acide transformant les amides en acides carboxyliques.
Alors, quand tu as un QCM comme ça, dans un premier temps, ne panique pas : p
On te dit que le peptide est analysé après une hydrolyse acide, il faut donc savoir que les glutamines deviendront des glutamates et que les asparagines deviendront des aspartates, et que tous les acides aminés seront sous forme séparées et protonnées.
"Afin de les séparer, les acides aminés obtenus sont ajustés à pH 12 puis déposés sur une colonne constituée de résine polystyrène d'ammonium quaternaires (comportant des charges positives sur le réseau de la résine"
Ca veut dire qu'une fois que le peptide est lysé, on met ces acides à pH=12, de façon à arracher leurs protons et donc à créer des charges négatives, puis on place ces acides sur une colonne comportant des charges +
Donc a ce moment la, tous les acides aminés sont fixés sur la colonne d'ammoniums quaternaires chargés positivement.
On va ensuite faire varier le pH de la solution en ajoutant de l'acide, et on a le graphique représentant la concentration d'acides aminés en fonction du temps, selon le pH.
Le principe, c'est qu'en ajoutant de l'acide, les acides aminés vont se reprotonner, et donc avoir une charge positive, induisant leur "décrochage" de la colonne d'ammonium quaternaire, ce qui implique qu'ils seront libres dans la solution et qu'on pourra doser leur concentration.
Apres tu regardes l'énoncé : "Si le peptide de départ, non hydrolysé, avait été ajouté au mélange, il aurait été élué :"
Quand tu vois ça, tu dois te rendre compte rapidement qu'il te faut le pHi de ton peptide global (K-L-D-H). (En le faisant rapidement je trouve 7.5, a vérifier)
Ensuite, les pHi des acides aminés séparés :
K -> 9.7
L -> 6
D -> 3
H -> 7.8
A partir de ça, on peut établir l'ordre de décrochage de la colonne des différents acides aminés :
On part d'un pH très alcalin, jusqu'à un pH très acide,
-> le 1er à se décrocher sera K
-> le 2ème sera H
-> le 3ème sera L
-> le 4ème sera D
On demande à quel moment serait élué le peptide global si il était présent au milieu de ces acides aminés, accrochés à la colonne :
A. Entre la leucine et l'acide aspartique : NON, le pI de L est 6, le pI de D est 3, le pI du peptide est 7.5, donc il ne sera pas élué entre ces deux acides aminés
B. En meme temps que la leucine : NON, pour ça il faudrait qu'il ait le même pI que la leucine, à savoir, 6.
C. Entre la leucine et l'histidine : pI(L) = 6, pI(H) = 7.8, pI(KLDH) = 7.5 -> OUI
D. Entre la lysine et l'histidine : NON, il sera élué avant l'histidine, donc il ne pourra pas etre élué entre l'histidine et la leucine
E. En même temps que l'histidine : NON, il faudrait qu'il ait le même pI que l'histidine.
Donc voila, réponse C.
Je t'ai détaillé tout le raisonnement, mais le jours du concours, si tu as un QCM comme ça qui tombe, va a l'essentiel, ce QCM est faisable très rapidement avec un peu d'habitude (:
♣ Tut'Biochimie - 2011/2012 ♣