Identification des allèles

[Snoopy]

Bonjour à tous,

J'ai un problème de compréhension, concernant la séparation des bactéries en fonction des allèles...
Je comprend toutes les étapes de clonage, mais je ne vois pas comment on peut séparer les bactéries en fonction de l'allèle recus (respectivement bleu et rouge).
Après avoir introduit le vecteur dans les plasmides, puis insérer le plasmide dans une bactérie on se retrouve avec certaines bactéries ayants l'allèle rouge et d'autres ayant l'allèle bleus jusque là c'est bon. Mais je ne vois pas comment on peut savoir quelle bactérie a reçu l'allèle bleu et quelle bactérie a reçu l'allèle rouge...
Une petite explication est la bienvenue !
Merci d'avance

[Blay]

Je me pose également la question, ce serait top d'avoir une réponse !

[Dawn]

Coucou !

Alors je vais essayer de vous répondre:

Après avoir introduit le vecteur dans les plasmides, puis insérer le plasmide dans une bactérie on se retrouve avec certaines bactéries ayants l'allèle rouge et d'autres ayant l'allèle bleus jusque là c'est bon. Mais je ne vois pas comment on peut savoir quelle bactérie a reçu l'allèle bleu et quelle bactérie a reçu l'allèle rouge...

Alors après le clonage tu vas faire ton séquençage.

1)Tu prends tes différentes colonies (qui ont chacune pour origine une bactérie soit une des 2 versions de l'allèle --> bleu ou rouge ici)
2)Une fois que tu les as isolé tu passes à l'étape d'extraction de l'ADN recombinant.
on ne sait toujours pas à qu'elle population on a à faire.
3)Tu passes à la vérification de l'insert par séquençage
c'est cette étape qui est la seule en mesure de séparer, d'identifier l'allèle auquel tu as à faire dans une des populations données.
Je m'explique :
On a réussi à séquencer tout le génome humain on connait les séquences de tous les gènes.
Quand tu vas faire le séquençage de ton insert --> si c'est l'allèle sauvage tu le sauras car en te référent aux séquences de référence (il doit il y avoir une banque de donnée je suppose de tous les gènes séquencés) tu trouveras celle de ton gène, de ton allèle.
en revanche tu ne trouveras pas la séquence de ton allèle muté puisque qu'il n'est pas répertorié (--> et en le comparant à l'allèle sauvage, tu trouveras l'anomalie)

Voilou ! j'espère que c'est assez claire, que ça t'aide et que c'est correct

[Snoopy]

Ok merci beaucoup ! J'y avais pensé mais vu les schémas de la prof (ou il y a effectivement d'un coté les bactéries avec l'allèle bleu et d'un autre côté les bactéries avec l'allèle rouge) je me suis un peu embrouillée car je ne savais pas si c'était didactique ou pas !
Merci encore

[Dawn]

De rien

[gabriel]

bonne explication Dawn...c'est a peu pret ça....si tu as compris je ne vais pas t'embrouiller avec des termes bcp plus technique....

[Dawn]

c'est a peu pret ça....si tu as compris je ne vais pas t'embrouiller avec des termes bcp plus technique....

mais si ce n'est pas tout à fait ça, une explication tutoresque n'est pas de refus (si ça ne te dérange pas bien sûre !)

[gabriel]

c'est bien ça sinon j'aurais rectifié...c'est juste pas tout à fait les bons termes scientifiques....mais c'est du chipotage tutoresque!!!:)

[Dawn]

D'accord merci de la confirmation alors

[gabriel]

de rien