(OK) Sonde calcique

[Peach]

Bonjour
Je ne comprend pas bien le principe de la sonde calcique dans l'application au fret
Est-ce que vous pourriez me ré-expliquer?
Merci

[Dawn]

Coucou !

Alors, la sonde calcique permet de mesurer les variations de concentration en calcium dans la cellule car on va voir que le FRET est propotionnel à la concentration en calcium.

Comment ?
il fallait trouver une protéine qui en présence de calcium voit sa conformation changer --> pour application d'un FRET intramoléculaire
il existe la calmoduline, qui est une protéine qui voit sa conformation se modifier en présence de calcium --> quand elle fixe 4 Ca²⁺, sa conformation se voit modifier

Comment utiliser cette propriété pour observer la variation des concentration de calcium dans la cellule ?
on va fixer 2 fluorochromes différents sur notre calmoduline "au repos" --> les 2 fluorochromes sont distant de plus de 10 nm --> pas de FRET possible
quand du calcium sera présent et viendra se fixer à notre calmoduline, sa conformation va se modifier dans l'espace, ce qui va faire que nos 2 fluorochromes vont se rapprocher l'un de l'autre --> ils seront à moins de 10 nm l'un de l'autre --> le FRET va avoir lieu

Conclusion:
s'il y a FRET qui se produit c'est qu'il y a du calcium dans la cellule et plus la [Ca₂₊] sera élévée plus le FRET va se produire (car il y aura plus de calmodulines qui fixeront des Ca²⁺)

Voilou, j'espère que c'est bon

[Choubi]

Voili voilou tout est dit et même très clairement dit !
Si tu n'as toujours pas compris mais j"en doute, n'hésites pas

[Peach]

Merci, c'est vraiment plus clair
MERCI!

[Dawn]

De nada